兔抗内脂素抗体亲和纯化，高特异性识别C端表位，IP/WB双平台验证

产品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的抗Visfatin抗体（货号A300-779A）是一款针对人源Visfatin蛋白的高效价兔多克隆抗体。该抗体以Whole IgG形式提供，经抗原亲和纯化处理，未偶联标记，适用于免疫沉淀（IP）和免疫印迹（WB）实验。其核心规格参数如下：

参数 详细信息

靶点 Visfatin

反应性 人

宿主 兔

克隆性 多克隆

格式 Whole IgG

浓度 200 ?g/ml

纯度 抗原亲和纯化

同种型 IgG

免疫原与特异性

该抗体识别的表位位于人Visfatin蛋白的441位残基与C末端之间。具体而言，表位区域对应第450位至C末端（第491位残基），参考序列编号基于NP_005737.1条目（GeneID 10135）。免疫原为人源Visfatin蛋白的该区域。

抗体生产采用固相固定化表位亲和纯化技术，使用针对Visfatin的特异性表位进行纯化，确保高特异性和低交叉反应性。

储存与稳定性

储存条件：2 8°C

有效期：自收货之日起1年

缓冲液组成：Tris缓冲盐水，含0.1% BSA及0.09%叠氮化钠

抗体浓度通过比尔定律测定，以1 mg/ml IgG在A280吸光度为1.4作为标准进行校准。

应用与方法参数

通用实验条件

所有免疫印迹实验均采用5% Milk-TBST作为封闭液和抗体稀释液。一抗孵育条件为过夜。

检测体系

实验类型 检测抗体方案

细胞裂解液Western Blot 羊抗兔IgG重链和轻链抗体（A120-101P）

免疫沉淀物Western Blot 抗兔IgG轻链HRP偶联抗体，封闭缓冲液中添加5%正常猪血清（货号S100-020）

推荐工作浓度

应用 推荐用量/稀释比

免疫沉淀（IP） 6 ?g/mg裂解物

免疫印迹（WB） 1:2000 1:10000

背景信息：Visfatin/PBEF/NAMPT

Visfatin又称PBEF（前B细胞增强因子）和NAMPT（烟酰胺磷酸核糖基转移酶），最初作为促进B细胞分化的因子被发现。该蛋白是一种分泌因子，在脂肪细胞中高表达。

细胞内功能：作为胞浆酶参与烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）的合成。

病理生理关联：Visfatin水平与肥胖及2型糖尿病呈正相关。该蛋白可与胰岛素受体结合，具有降低血糖的作用。

别名

1110035O14Rik、NAmPRTase、Nampt、nicotinamide phosphoribosyltransferase、PBEF、PBEF1、pre-B cell-enhancing factor、pre-B-cell colony-enhancing factor 1、VF、VISFATIN

使用注意事项

1. 防腐剂提示：缓冲液含0.09%叠氮化钠，该化合物有毒性，操作时请佩戴适当防护用品。

2. 稀释优化：对于不同批次样品和实验体系，建议对WB稀释比（1:2000-1:10000）进行梯度预实验优化。

3. IP用量计算：按照6 ?g抗体/mg总蛋白裂解物的比例计算抗体用量。

4. 轻链特异性检测：免疫沉淀后的Western Blot检测应使用抗兔IgG轻链HRP抗体，避免重链信号干扰。

本抗体为研究Visfatin在代谢疾病（尤其是糖尿病和肥胖）中的作用、NAD合成通路调控以及B细胞分化机制等领域提供了可靠的工具。