兔抗Rictor抗体亲和纯化，确保批次间稳定性和实验重复性

一、产品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的Rictor抗体（货号A300-458A）是一款针对人Rictor蛋白的兔源多克隆抗体，由美国制造，采用抗原亲和纯化工艺制备。该抗体以未偶联的完整IgG形式提供，浓度为1000 ?g/ml，适用于免疫沉淀（IP）和免疫印迹（WB）实验。

二、技术规格

参数 | 详细信息

靶标 | Rictor

反应性 | 人

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

格式 | 完整IgG

亚型 | IgG

偶联物 | 未偶联

纯度 | 抗原亲和纯化

抗原物种 | 人

浓度 | 1000 ?g/ml

保存条件 | 2-8°C

有效期 | 收货后1年

缓冲液体系：Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液，pH 7-8，含0.09%叠氮化钠作为防腐剂。

免疫原信息

该抗体识别的表位位于人Rictor蛋白第1至50位氨基酸残基之间（编号参考TrEMBL条目Q6R327，GeneID 253260）。亲和纯化过程使用固相载体上固定的Rictor特异性表位进行。经严格验证，该抗体在WB中可特异性识别约190 kDa的Rictor蛋白条带，

抗体浓度通过比尔定律测定，其中1 mg/mL IgG在280 nm波长下的吸光度为1.4。

三、应用方法与实验条件

免疫印迹（WB）

推荐稀释比：1:2000 至 1:10000

封闭与稀释液：5% 牛奶-TBST

一抗孵育：过夜孵育

细胞裂解物检测：使用山羊抗兔IgG重轻链抗体（A120-101P）

免疫沉淀物检测：使用抗兔IgG轻链HRP偶联抗体，封闭缓冲液中需添加5%正常猪血清（货号S100-020）

注意：使用A300-458A进行的免疫印迹会显示额外的条带，这些条带在使用A300-459A时不会出现。

免疫沉淀（IP）

推荐用量：6 ?g抗体/ mg裂解物

四、产品背景信息

Rictor是mTORC2复合物的一个亚基，在响应激素信号调控细胞生长和存活中发挥关键作用。mTORC2可被生长因子激活，但与mTORC1不同的是，它对营养信号似乎不敏感。

功能特征

mTORC2主要定位于Rho GTPases上游，通过激活一个或多个Rho型鸟嘌呤核苷酸交换因子来调控肌动蛋白细胞骨架。该复合物能够促进血清诱导的应力纤维或F-肌动蛋白的形成。

关键磷酸化调控

AKT1：mTORC2对AKT1的Ser-473位点磷酸化起关键作用，这可能促进PDK1对AKT1活化环上Thr-308位点的磷酸化——这是AKT1完全活化的先决条件

SGK1：调控SGK1 Ser-422位点的磷酸化

PRKCA：调节PRKCA Ser-657位点的磷酸化

别名：

AVO3、AVO3 homolog、hAVO3、PIA、pianissimo、rapamycin-insensitive companion of mTOR、TORC2-specific protein AVO3

五、使用建议

1. 储存注意事项：收到抗体后请存放于2-8°C，避免冻存，以防反复冻融导致活性下降。

2. 防腐剂提示：缓冲液中含有叠氮化钠，使用时应采取适当防护措施。

3. 实验优化：对于WB实验，建议在推荐稀释比范围内进行梯度测试，以获得最佳信噪比。IP实验中按6 ?g/mg裂解物的用量起始，可根据具体样本类型进行优化。

4. 对照设置：由于A300-458A可能检测到额外条带，建议在实验中同时使用A300-459A作为平行对照，以区分特异性信号与非特异性信号。