抗HdmX/MDM4兔多克隆抗体，轻链特异性二抗兼容设计方案

一、产品概述

HdmX（又称MDM4）是p53信号通路的关键负调控因子，与MDM2协同作用抑制p53的转录活性并促进其降解。由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的抗HdmX/MDM4兔多克隆抗体（A300-287A）为针对人HdmX/MDM4蛋白的兔多克隆抗体，经抗原亲和纯化，适用于免疫沉淀（IP）和蛋白质印迹（WB）检测。抗体识别表位位于MDM4蛋白第125–175位氨基酸区域，可特异性检测人源MDM4蛋白，为p53通路研究提供可靠工具。

二、关键规格

参数 | 详细信息

靶标 | HdmX / MDM4

反应性 | 人

应用 | IP, WB

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

形式 | 完整IgG

免疫原 | 第125–175位氨基酸区域

同型 | IgG

偶联物 | 未偶联

纯度 | 抗原亲和纯化

抗原种属 | 人

浓度 | 1000 ug/ml

保存条件 | 2 – 8 °C

有效期 | 收货后1年

缓冲液 | Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液，pH 7-8，含0.09%叠氮化钠

三、生物学背景

MDM4（Gene ID 4194，Uniprot O15151，官方基因名MDM4，p53 regulator）是mouse double minute 4的人类同源物，又称HDMX、MDMX或MRP1。MDM4蛋白包含RING指结构域，可与p53直接相互作用。虽然MDM4本身缺乏E3泛素连接酶活性，但它通过与结构相似的MDM2结合，增强MDM2介导的p53泛素化和蛋白酶体降解。此外，MDM4还可直接抑制p53的转录激活功能，是p53通路中不可或缺的负调控因子。

MDM4在多种肿瘤中过表达，通过抑制p53活性促进肿瘤发生和耐药性，因此成为癌症研究和药物开发的重要靶点。本抗体识别的表位位于MDM4蛋白的第125–175位区域，该区域靠近N端p53结合域，适合检测全长MDM4及其相互作用复合物。

别称：Double minute 4蛋白、HDMX、MDM2样p53结合蛋白、MDM4蛋白变异体G/Y、MRP1、p53结合蛋白MDM4等。

四、储存与稳定性

抗体以1000 ug/ml浓度提供于Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液（pH 7-8）中，含0.09%叠氮化钠防腐剂。收到后请于2–8°C条件下储存，严禁冷冻。反复冻融会导致蛋白变性或聚集。在此条件下，自收货之日起可稳定保存1年。

注意：叠氮化钠具有毒性，且可能抑制HRP活性。如用于HRP检测系统（如WB中的化学发光），应确保充分洗涤；若需去除防腐剂，可使用脱盐柱或透析。

五、应用与推荐稀释度

蛋白质印迹（WB）

推荐稀释范围：1:1000 – 1:5000

封闭与抗体稀释液：5%脱脂牛奶-TBST

一抗孵育：过夜孵育（推荐4°C）

标准WB二抗：山羊抗兔IgG（重链+轻链）抗体（货号A120-101P）

免疫沉淀后WB的特殊注意事项

当检测免疫沉淀复合物中的MDM4时，常规抗兔IgG二抗会识别免疫沉淀所用抗体的重链（约55 kDa）和轻链（约25 kDa）。MDM4的分子量约为55–60 kDa，与IgG重链大小接近，可能被重链信号掩盖。因此，免疫沉淀产物的WB检测推荐使用抗兔IgG轻链HRP偶联抗体，并在封闭缓冲液中添加5%正常猪血清（货号S100-020），以选择性识别轻链而避免重链干扰。

免疫沉淀（IP）

推荐用量：6 ug抗体 / mg细胞裂解液

六、注意事项

1. 仅限研究使用：本产品仅用于生命科学研究，不得用于临床诊断、治疗或人体相关应用。

2. 安全操作：缓冲液含叠氮化钠，操作时请佩戴防护手套和护目镜，避免皮肤接触。

3. 批次验证：不同批次抗体浓度已标准化为1000 ug/ml，但建议收到新批次后在特定应用中进行稀释度验证。

本抗体为研究MDM4在p53信号通路、肿瘤发生及耐药性中的功能提供了高特异性的检测工具。