兔抗MCM2抗体亲和纯化，表位特异性富集，三平台高信噪比验证

产品概述

MCM2（微型染色体维持蛋白2）是DNA复制 licensing 过程中的核心组件，属于MCM复合物（MCM2-7六聚体）的重要组成部分。本文介绍的由艾美捷Bethyl Laboratories推出的A300-191A抗体（货号：A300-191A）是一款针对MCM2的高质量兔多克隆抗体，适用于小鼠和人类样本的多种检测应用。

基本规格

该抗体为兔源多克隆IgG，以完整IgG形式提供，未经偶联修饰。免疫原对应人MCM2蛋白第1至50位氨基酸残基区间（参考序列NP_0045117.2，GeneID 4171）。抗体经抗原亲和纯化，纯度可靠。浓度测定采用比尔定律（1 mg/mL IgG在A280nm处吸光度为1.4），最终浓度为1000 ?g/ml。

储存与稳定性：抗体保存于Tris-柠檬酸/磷酸缓冲液（pH 7-8），含0.09%叠氮化钠作为防腐剂。应在2-8°C条件下储存，自收货之日起稳定期为1年。注意：产品生产地为美国。

推荐应用与实验条件

1. 免疫印迹（Western Blot，WB）

稀释比例：1:1000 至 1:10,000

实验要点：

封闭液和抗体稀释液均使用含5%脱脂牛奶的TBST

一抗孵育建议过夜（O/N），以获得最佳信噪比

检测系统选择：

细胞裂解液样本：推荐使用山羊抗兔IgG（重链+轻链）二抗（如A120-101P）

免疫沉淀后样本：需使用HRP标记的抗兔IgG轻链特异性二抗，并在封闭缓冲液中添加5%正常猪血清（如S100-020），以避免重链交叉干扰

2. 免疫组织化学（IHC）

推荐稀释比：1:2000 至 1:10,000

抗原修复：对福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织切片，强烈推荐使用pH 6.0的柠檬酸缓冲液进行热诱导抗原修复。

3. 免疫沉淀（IP）

用量：每毫克裂解液蛋白使用6 ?g抗体

产品特性

特异性表位：抗体识别位点定位在人MCM2蛋白第1-50氨基酸区域。采用固相载体固定该特异性表位进行亲和纯化，确保高特异性。

反应种属：已验证可检测小鼠（Mouse）和人（Human）样本。

同种型：IgG

背景知识：MCM2的生物学功能

MCM2是微型染色体维持（MCM）复合物的关键亚基。MCM复合物由MCM2、MCM3、MCM4、MCM5、MCM6和MCM7六种蛋白组成异源六聚体，在DNA复制 licensing 中发挥核心作用，确保每个细胞周期中DNA仅复制一次。

具体而言，MCM2与核心复合物（MCM4/6/7）相互作用，调控其解旋酶活性。因此，MCM2的表达水平与细胞增殖状态密切相关，常被用作细胞增殖标志物。

别名：BM28、CCNL1、cdc19、CDCL1、D3S3194、DFNA70、MITOTIN、核蛋白BM28等。

技术建议与注意事项

1. 稀释优化：推荐的应用稀释比为起始参考范围，用户应根据具体实验体系和样本类型进行梯度稀释优化。

2. 叠氮化物影响：缓冲液中含有叠氮化钠，若计划进行细胞培养或体内实验，需注意其细胞毒性；对于HRP偶联检测系统，叠氮化物会抑制HRP活性，需在二抗孵育前充分洗脱。

3. 特殊检测需求：若需进行免疫沉淀后的Western blot检测，务必使用轻链特异性二抗，以免变性的抗体重链（约50 kDa）与目标蛋白信号重叠。添加正常猪血清可进一步降低非特异性背景。

A300-191A是一款经过抗原亲和纯化的高浓度兔抗MCM2多克隆抗体，适用于WB、IHC和IP等多种应用。其识别表位位于MCM2蛋白N端1-50区域，反应种属包括人和小鼠。实验者应根据具体应用选择推荐的稀释比例和配套检测试剂，尤其注意IP后WB需使用轻链特异性二抗并添加猪血清封闭，以获得清晰、特异的检测结果。储存于2-8°C可稳定保存一年。