基质胶作为一种重要的细胞外基质,具有广泛的应用价值。它可以用于各种研究领域,如细胞生物学、组织工程、肿瘤研究等。基质胶的特殊成分和结构为细胞提供了理想的生长环境,促进细胞的黏附、迁移和增殖。同时,基质胶还可以模拟人体组织的结构和功能,为研究人员提供了重要的工具。
这种生长因子减少的高浓度基底膜基质胶在细胞培养和研究中有广泛的应用。它为各种实验提供了理想的基质环境,如体内实验,PDX/CDX 异种移植和肿瘤成瘤模型的实验等。通过使用高浓度基底膜基质胶,研究人员可以更好地模拟体内细胞与基质之间的相互作用,进一步了解细胞行为和组织发育的机制。
高浓度基底膜基质胶的应用非常灵活。可以使用厚层凝胶法或薄层包被法将基质胶涂覆在培养表面上,具体操作可根据实验需求进行选择。该产品经过严格的质量认证,确保无病原体污染,并通过多种实验验证其生物功能。
无论您是进行细胞培养、组织工程研究还是肿瘤研究,Biogradetech基质胶都是您的理想选择。它为您的实验提供了可靠的3D培养基质支持,帮助您更好地理解细胞行为和组织发育的奥秘。立即尝试高浓度低生长因子的基质胶,开启您的细胞研究新篇章!
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产品货号 | 英文名称 | 中文名称 | 应用类型 |
HC Basement Membrane Matrix, Growth Factor Reduced (For in vivo experiments, PDX and CDX) | 高浓度,低生长因子,基质胶(体内实验,PDX/CDX 异种移植) | 蓝海领域:3D培养,类器官培养,干细胞培养 |
产品英文名称:HC Basement Membrane Matrix, Growth Factor Reduced (For in vivo experiments, PDX and CDX)
产品中文名称:高浓度,低生长因子,基质胶(体内实验,PDX/CDX 异种移植)
货号:A-MGL21
规格:5mL、10mL
储存条件:≤-20°C
产品描述:
Biogradetech货号A-MGL21高浓度低生长因子的基质胶是一种连续的特殊细胞外基质薄膜,形成了内皮细胞、上皮细胞、肌肉细胞或神经细胞与其相邻基质之间的界面。基质胶在发育和伤口愈合过程中会被降解和再生。它不仅支持细胞和细胞层,还对组织结构起着重要作用,影响细胞的粘附、迁移、增殖和分化。基质胶能够成为转移性肿瘤细胞侵袭的主要屏障。
Biogradetech货号A-MGL21高浓度低生长因子的基质胶是从Engelbreth-Holm-Swarm(EHS)肿瘤中纯化得到的可溶性基质胶。此高浓度低生长因子的基质胶在37°C下形成重组基底膜基质胶。高浓度低生长因子的基质胶的主要成分包括层粘连蛋白、IV型胶原、粘连素和肝素硫酸酯蛋白聚糖。
适用范围:
该系列分为标准型高浓度和低生长因子高浓度,其浓度和粘度均高于普通浓度的基质胶,更适合于体内实验(动物模型),如PDX、CDX、体内血管生成测定等。
产品参数:
1. 来源:小鼠肿瘤;
2. 颜色:含酚红的基质胶呈黄粉色,无酚红的基质胶呈半透明淡黄色;
3. 形态:标准型基质胶在4°C下溶解为透明液体;高浓度基质胶在0°C下溶解后为透明液体,长时间放置于4°C后会半凝胶化。
4. 浓度:蛋白质浓度范围为8至26 mg/mL。
5. 内毒素:≤ 4.5 EU/mL
6. 凝胶时间:室温下5-30分钟凝胶,当温度从22°C升至37°C时,凝胶形成速度加快。
包被涂层方法:
打造成功的细胞培养环境,关键在于选择合适的基质胶。其中,基质胶的包被涂层方法对于不同的应用需求有所不同。下面,我们将介绍基质胶的包被涂层步骤,帮助您轻松应对各种细胞培养挑战。
首先,让我们来了解一下基质胶的解冻过程。将Biogradetech货号A-MGL21高浓度低生长因子的基质胶在2-8°C的冰箱中过夜解冻。由于冰箱温度可能有所不同,因此建议在解冻过程中将基质胶放在冰上保持低温,以防止过早凝胶化。解冻后的基质胶在15°C以上的温度下会迅速凝固,因此在使用时要保持冰上状态,以避免不必要的凝胶形成。
Biogradetech货号A-MGL21高浓度低生长因子的基质胶有许多应用场景,需要不同的厚度和浓度。例如,用于内皮细胞形成类似毛细血管的结构(管状结构形成实验)、大鼠主动脉组织分化为类似毛细血管的结构(主动脉环形成实验)、上皮器官样结构形成或肿瘤器官样结构形成,需要较厚的凝胶,也就是厚层凝胶法。而一些应用,如原代细胞的传代培养,需要薄层涂层而不是厚凝胶,因此应采用薄层凝胶法。
厚层凝胶法:
1. 按上述方法解冻基质胶;
2. 缓慢上下移液将基质胶混匀,注意不要引入空气泡;
3. 向细胞培养板表面加入200-300μL/cm2基质胶,平铺均匀,注意避免产生气泡;
4. 将培养板放置在 37 ℃,等待 30 min 形成凝胶即可使用。
薄层包被法:
1. 按上述方法解冻基质胶;
2. 缓慢上下移液将基质胶混匀,注意不要引入空气泡;
3. 根据实验需求使用预冷的培养基稀释。建议将基质胶稀释为1:100以用于原代细胞的扩增。对于您的应用,可能需要经验性地确定最佳涂层浓度;
4. 加入适量体积的该溶液覆盖整个细胞培养板表面。建议加入300μL/cm2的溶液;
5. 将培养板放置在室温,孵育至少1h;
6. 吸去上清即可使用。不要让涂层表面干燥。
通过以上步骤,您可以根据不同的细胞培养需求,灵活选择适合的基质胶涂层方法。无论是厚凝胶还是薄层涂层,都能为您的细胞研究提供稳定的3D培养支持,助您取得优异的实验结果。赶快尝试基质胶涂层方法,提升您的细胞培养实验效果吧!
实验操作示例:小鼠皮下肿瘤形成
1. 设备、试剂和耗材
1.1 设备:生物安全柜,细胞培养箱,低温卧式离心机,倒置显微镜;
1.2 试剂:基质胶(货号:A-MGL21 / A-MGL23 / A-MGL24 / A-MGL26),基础培养基,含有10%胎牛血清的培养基,1×PBS,胰蛋白酶溶液;
1.3 耗材:无菌移液器枪头、10cm细胞培养皿、无菌EP管、一次性注射器和其它耗材(或根据实验设计进行调整)。
2. 实验内容和方法
2.1. 将Biogradetech货号A-MGL21高浓度低生长因子的基质胶放入冰盒中,在4°C的冰箱中慢慢解冻过夜;
2.2. 选择生长状况良好且呈对数生长的细胞,弃去上清液,加入2 mL 1×PBS溶液轻轻洗涤,弃去液体;
2.3. 在培养皿中加入1 mL 0.25%胰蛋白酶细胞消化液,静置10秒钟,弃去胰蛋白酶,用残留的胰蛋白酶在室温下继续消化1~3分钟;
2.4. 当细胞变圆(请记住,不能消化到细胞边缘清晰时),加入1 mL含有10%胎牛血清的培养基终止消化。小心地吹散细胞,将细胞悬浮液收集到15 mL塑料离心管中;
2.5. 以1000 rpm离心3分钟,弃去上清液。用PBS洗涤细胞一次后,通过加入无血清基础培养基重新悬浮细胞,并取10 ?L细胞悬液进行细胞计数;
2.6.
HepG2细胞:每只小鼠接种500万个细胞。根据细胞密度,将所需的细胞悬液放入无菌的1.5 mL塑料离心管中,以1000 rpm离心3分钟。弃去上清液,加入无血清培养基或PBS,直到总体积为300 μL;
HCT-116细胞:每只小鼠接种100万个细胞。根据细胞密度,将所需的细胞悬液放入无菌的1.5 mL塑料离心管中,以1000 rpm离心3分钟。弃去上清液,加入无血清培养基或PBS,直到总体积为300 μL;
MIA-PaC-2细胞:每只小鼠接种1000万个细胞。根据细胞密度,将所需的细胞悬液放入无菌的1.5 mL塑料离心管中,以1000 rpm离心3分钟。弃去上清液,加入无血清培养基或PBS,直到总体积为500 μL;
2.7. 基质胶的混合:将细胞悬液与基质胶以1:1的比例在4°C下混合;
2.8. 皮下注射:左手将裸鼠固定住,右手将细胞悬液皮下注射到裸鼠的右背部。在接种过程中,将针头稍微插入皮下,约深1cm,以减少注射后细胞悬液从注射点溢出,注射体积为100 μL。MIA-PaC-2细胞注射200 μL/个;
2.9. 数据记录:将裸鼠放回笼子继续饲养,根据实验要求定期测量肿瘤体积,记录数据并绘制曲线,在肿瘤体积小于2000 mm3之前,安乐死裸鼠,取出肿瘤并拍照记录。
Biogradetech是生命科学和医药研发行业关键原料与试剂的领先供应商。他们提供广泛的产品组合,包括细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域的试剂。Biogradetech的产品受到全球生物研究机构和生物制药公司的高度追捧,他们以高质量、可靠性和服务而闻名。
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