淋巴细胞介导的细胞毒性是一种针对细胞内病原体(包括病毒、某些细菌和寄生虫)的细胞免疫形式。监测淋巴细胞介导的靶细胞毒性的最常见体外方法是细胞介导的细胞毒性检测,例如ADCC(抗体依赖性细胞毒性)和TDCC(T细胞依赖性细胞毒性)。在这些检测中,免疫效应细胞和靶细胞被共同培养。为了分析这种异质性细胞群体中免疫效应细胞的细胞毒性活性,能够区分效应细胞和靶细胞群体是至关重要的,因为它们具有不同的表型。使用膜可渗透的荧光染料CSFE(羧基荧光素琥珀酰亚胺酯)在与效应细胞共培养之前对靶细胞进行标记,能够清晰地区分活的效应细胞和靶细胞。与靶细胞孵育后,可以添加DNA嵌入染料7-AAD来标记正在死亡的靶细胞。这两种染料具有不同的光谱特性,通过流式细胞术可以区分四种细胞群体:活靶细胞(CSFE?7-AAD?)、死靶细胞(CSFE?7-AAD?)、活效应细胞(CSFE?7-AAD?)和死效应细胞(CSFE?7-AAD?)。细胞毒性检测对于理解CAR(嵌合抗原受体)T细胞和NK细胞以及基于抗体的免疫疗法的效力至关重要。
细胞毒性染料试剂盒(CFSE,7-AAD)是用于确定效应细胞对感兴趣靶细胞的细胞毒性特征的试剂盒。它包含用于在靶细胞和PBMC混合细胞群体中标记靶细胞的CFSE(羧基荧光素琥珀酰亚胺酯),以及用于标记死细胞的7-AAD(7-氨基放线菌素D)。CFSE和7-AAD标记使得通过流式细胞术在单细胞水平上检测细胞毒性成为可能。试剂盒还包含检测稀释液。
艾美捷BPS Bioscience-细胞毒性染料试剂盒(CFSE,7-ADD):
货号:82296
应用:在细胞毒性检测中,通过流式细胞术分析活靶细胞、死靶细胞、活效应细胞和死效应细胞。
运输温度:-80℃
警告:避免冻融循环
科学分类:CAR-T细胞疗法
监管状态:仅供研究使用
储存/稳定性:按照指示储存时,该检测试剂盒在收到之日起6个月内表现最佳。
所需材料但未提供
感兴趣的效应细胞。
感兴趣的靶细胞。
用于细胞培养的U型底96孔板。
T75细胞培养瓶。
结果示例:
图:流式细胞术分析与效应PBMCs共孵育的CFSE标记NALM-6靶细胞。
将CFSE标记的NALM-6细胞与PBMCs以10:1(E:T)的细胞比例共孵育24小时,左侧未添加,右侧添加了抗CD19-抗CD3双特异性分子(BPS Bioscience #100441),并用7-AAD染色15分钟。密度图中的CFSE?/7-AAD?群体对应于正在死亡的靶细胞(Q2-2)。
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