PDE3A测定试剂盒是一种荧光偏振(FP)均质96孔板试剂盒,专为筛选和鉴定PDE3A(磷酸二酯酶3A)抑制剂而设计。该测定利用了一种特定的荧光磷酸盐结合纳米颗粒。试剂盒包含足够的纯化重组PDE3A(氨基酸669-1141(末端))、荧光探针、PDE测定缓冲液、结合剂以及稀释液,可供100次反应使用。
测定使用了标记有荧光素的环化腺苷酸单磷酸(cAMP-FAM用于PDE3A),其中磷酸基团嵌入在环状核苷酸中。这是一种非常小的分子,旋转速度快(低FP)。PDE3A催化环状核苷酸中磷酸二酯键的水解,释放出磷酸基团。在第二步中,游离的磷酸基团被一种特定的磷酸盐结合纳米珠(结合剂)识别,形成一个大复合物,其运动受限(高FP)。FP与PDE3A活性成正比。
艾美捷BPS Bioscience-PDE3A检测试剂盒:
货号:79736
同义词:磷酸二酯酶3A,PDE3A,PDE3-A,PDE
试剂盒格式:荧光偏振
物种:人
提供方式:试剂盒包含足够的纯化重组PDE3A(氨基酸669-1141(末端))、荧光探针、PDE测定缓冲液、结合剂以及稀释液,可供100次反应使用。
所需材料但未提供:
-可调节微量移液器及无菌吸头
-旋转或摇动平台
-能够测量荧光偏振的荧光微孔板读取器(λex=470(5nm带宽)和在λem=528(10nm带宽)处检测)
储存/稳定性:当按照指示储存时,该测定试剂盒在收到之日起6个月内表现最佳。
使用说明:请参阅试剂盒说明书以获取详细操作步骤。
应用:用于研究酶动力学,并在高通量筛选(HTS)应用中筛选小分子抑制剂以进行药物发现。
运输温度:-80°C
仅用于研究
检测结果示例:
图:西洛他唑对PDE3A的抑制作用。在200nMFAM-环化-3',5'-AMP底物存在的情况下,PDE3A与西洛他唑的不同浓度进行孵育。使用TecanM1000荧光微孔板读取器测量荧光偏振。结果以活性百分比表示,其中在没有抑制剂(阳性对照)的情况下,FP被设定为100%。
文献参考:
Kamel R., et al., 2023 Nat Rev Cardiol 20(2):90-108.
Nazir M., et al., 2017 Exp Cell Research 361(2):308-315.
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