PARPtrap? PARP1和PARP2联合检测试剂盒是一种均质荧光偏振(FP)检测,旨在用于高通量筛选(HTS)格式中测量PARP1(聚(ADP-核糖)聚合酶1)和PARP2(聚(ADP-核糖)聚合酶2)DNA复合物的形成,从而实现对PARP1/2捕获的测量。该试剂盒采用便捷的384孔板格式,包含足够进行400次酶反应的纯化重组PARP1酶、PARP2(氨基酸2-583)、荧光标记的寡核苷酸双链、NAD?和PARPtrap?检测缓冲液。
荧光标记的寡核苷酸双链是小型荧光探针,可以在溶液中自由旋转,因此具有较低的荧光偏振(FP)。在没有核糖基化的情况下,PARP1/2与其荧光探针结合,形成一个较大的复合物。在NAD?存在的情况下,PARP1/2发生自身核糖基化并从荧光寡核苷酸双链上解离,随后可以再次自由旋转(低FP)。在PARP1/2抑制剂存在的情况下,PARP1/2可以被“捕获”在荧光寡核苷酸双链上,从而导致较高的FP。FP信号的增加与PARP1/2的捕获成正比。
艾美捷BPS Bioscience-PARPtrap -PARP1和PARP2联合检测试剂盒:
货号:78317
同义词:聚(ADP-核糖)聚合酶2、聚(ADP-核糖基)转移酶2、ADPRT、PARP2、聚(ADP-核糖)聚合酶1、聚(ADP-核糖基)转移酶、PARP1、PARP-1、PARP-2
试剂盒格式:荧光偏振
适用物种:人
靶点:PARP1、PARP2
储存/稳定性:按照指示储存时,该检测试剂盒在收到之日起6个月内表现最佳。
应用:筛选能够增强PARP1/2捕获到DNA上的小分子,用于药物发现和高通量筛选(HTS)应用,以及IC50的测定。
运输温度:-80℃
所需材料但未提供
无核酸酶蒸馏水
可调节微量移液器及无菌吸头
旋转或摇摆平台
能够测量荧光偏振的荧光微孔板读取器(λex=470 nm(5 nm带宽)和在λem=518 nm(10 nm带宽)处检测)
结果示例:
图:Talazoparib、AZD5305、Olaparib和Veliparib对PARP1捕获到DNA的影响。
在Talazoparib、Olaparib、Veliparib和AZD5305(#78318)浓度逐渐增加的情况下,测量PARP1捕获到DNA上的情况。“无化合物”对应于“低FP对照”,“无NAD?”对应于“高FP对照”条件。
文献参考:
Murai J., et al., 2014 Molecular Cancer Therapeutics 13: 433-443
Murai J., et. al., 2012 Cancer Research 72: 5588-5599
Zandarashvili L., et al., 2020 Science 368(6486): 6367
Marques M., et al., 2019 Oncogene 38 (12): 2177-2191.
Gui B., et al., 2019 Proc Natl Acad Sci USA 116 (29): 14573-14582.??
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