一、概述
AlexaFluor647AffiniPure驴抗大鼠IgG(H+L)是一种经过高度纯化与严格吸附的二抗,主要用于检测大鼠来源的一抗。该抗体以驴作为宿主,其特异性针对大鼠免疫球蛋白G的整个分子,并能与大鼠其他免疫球蛋白的轻链发生反应。其最显著的特点是偶联了高性能的远红色荧光染料AlexaFluor647,使其在流式细胞术、共聚焦显微镜超分辨率成像等现代生物技术应用中表现出色。
为确保特异性,Alexa Fluor 647 AffiniPure驴抗大鼠IgG (H+L)多克隆抗体(货号:712-605-153)已通过固相吸附处理,将其与牛、鸡、山羊、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、小鼠、兔和绵羊的血清蛋白发生交叉反应的可能性降至最低。这意味着在含有这些物种血清或蛋白的样本中进行实验时,背景噪音将得到有效控制。
Jackson 总部位于美国宾夕法尼的兰卡斯特,距离费城大概有40英里。Jackson在1982年由科学家展开了包括在细胞生物学,蛋白质化学,微生物学,免疫学及产品开发实验研究。 Jackson产品仅用于研究,不用于诊断或治疗用途。作为美国各种二抗生产公司之一,Jackson在各国设有几十家代理。由于其产品效价高、种类全、价格低廉,因而成为各大药厂、试剂盒生产厂、大型实验室采购此类试剂的优选。其产品主要包括:各种纯化的二抗、标记的二抗(AMCA、 Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、长臂生物素、辣根酶和碱磷酶标记)等。
二、核心抗体特性
*靶标:大鼠
*宿主:驴
*抗体形式:完整IgG分子
*特异性:针对大鼠IgG的重链和轻链
*交叉反应性:经吸附处理后,与多种常见物种血清蛋白的交叉反应J低。
*偶联物:AlexaFluor647
*产品类别:完整IgG亲和纯化抗体
*克隆性:多克隆抗体
1.关于完整IgG分子
本产品为完整的IgG抗体分子,通过免疫亲和层析技术从抗血清中分离获得。完整的IgG分子包含一个Fc片段和两个通过二硫键连接的抗原结合Fab片段,因此是双价的,具有两个抗原结合位点。其分子量约为160kDa。这种形式的抗体适用于绝大多数免疫检测实验,并且通常是最具成本效益的选择。
2.纯度与缓冲体系
抗体通过抗原琼脂糖珠亲和层析法从抗血清中纯化而得,纯度J高。产品溶于0.01M磷酸钠、0.25MNaCl,pH7.6的缓冲液中,并添加了15mg/ml的无IgG、无蛋白酶牛血清白蛋白作为稳定剂。为防止微生物污染,产品中含有0.05%的叠氮化钠作为防腐剂。
三、使用指南
1.物理状态与储存
产品以冻干固体形式提供。在未重新溶解前,建议在2-8°C下储存。
2.重新水化与短期储存
使用时,请按照产品说明书指定的体积加入去离子水进行重新水化。若溶液不清澈,可进行离心。重新溶解后的抗体应在当天配制工作液使用。作为未稀释的液体,在2-8°C下可稳定保存约6周。
3.长期储存方案
为延长保存时间,建议采取以下两种方法之一:
*方案一:将重新水化后的抗体分装,并于-70°C或更低温度下冷冻保存,并应避免反复冻融。
*方案二:在抗体溶液中加入等体积的甘油,使其最终浓度为50%,然后以液体形式保存于-20°C。
重新水化后的产品有效期为一年。若经测试结果仍符合使用要求,有效期可适当延长。
4.工作浓度建议
产品的建议工作稀释比例范围为1:100至1:800。需要注意的是,最佳的稀释倍数受多种因素影响,如目标抗原的密度、样本的透性等。因此,使用者需根据具体的实验体系和条件,通过预实验来empirically确定最适宜的稀释度。
四、AlexaFluor647荧光标记详解
AlexaFluor647是一种性能优异的远红色荧光染料,其最大吸收峰位于651nm,最大发射峰位于667nm。
1.性能优势
*亮度高:在水性封片剂中,其亮度优于Cy5和DyLight650等同类染料。
*背景低:生物样本在远红光波段的自发荧光非常弱,使用AlexaFluor647可以显著降低背景信号,提高信噪比。
*多色标记理想选择:它是进行多色标记实验时,远红通道的绝佳选择,尤其适用于共聚焦显微镜。
*流式应用佳:对于流式细胞术,AlexaFluor647和APC标记的二抗是此波长范围内的最佳选择,且AlexaFluor647偶联物是比藻红蛋白更经济的替代方案。
2.使用注意事项
尽管优势明显,使用者也需注意其局限性:
*肉眼不可见:由于其发射峰在667nm,超出了人眼的敏感范围,无法直接通过目镜观察。
*需特定激发光源:汞灯无法最优地激发AlexaFluor647。它最常与配备有相应激光器(如633nm或640nm氦氖激光器)和远红探测器的共聚焦显微镜、STED或SIM超分辨率显微镜联用。
*不推荐用于传统荧光显微镜:因此,它不推荐用于传统的落射式荧光显微镜。
五、323篇文献中被引用

六、热门产品
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112-095-003 | 荧光素 (FITC) 偶联 AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG (H+L) |
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711-165-152 | Cy3 偶联 AffiniPure 驴抗兔 IgG(H+L)(最小 X Bov,Ck,Gt,GP,Sy Hms,Hrs,胡,Ms,大鼠,Shp Sr Prot) |
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