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Jackson丨艾美捷代理AlexaFluor488标记驴抗小鼠IgG(H+L)多克隆抗体:高特异性免疫荧光检测

发布者:艾美捷科技    发布时间:2025-10-21     
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在免疫荧光、流式细胞术等现代生物技术中,选择一款高性能的次级抗体是获得高信噪比、高灵敏度结果的关键。Cy3 AffiniPure驴抗兔IgG(H+L)多克隆抗体货号:711-165-152

正是这样一款专为苛刻实验要求设计的工具。它不仅具备对兔源一抗的高效识别能力,更以其卓越的交叉吸附特性与先进的Cy3荧光标记,成为多色标记实验中橙色荧光通道的理想选择。

 

Jackson 总部位于美国宾夕法尼的兰卡斯特,距离费城大概有40英里。Jackson在1982年由科学家展开了包括在细胞生物学,蛋白质化学,微生物学,免疫学及产品开发实验研究。 Jackson产品仅用于研究,不用于诊断或治疗用途。作为美国各种二抗生产公司之一,Jackson在各国设有几十家代理。由于其产品效价 高、种类全、价格低廉,因而成为各大药厂、试剂盒生产厂、大型实验室采购此类试剂的优选选。其产品主要包括:各种纯化的二抗、标记的二抗(AMCA、 Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、长臂生物素、辣根酶和碱磷酶标记)等。

 

一、核心特性:精准靶向与极低的交叉反应性

该抗体以驴作为宿主,特异性靶向兔的免疫球蛋白G。作为“全分子IgG”抗体,其结构完整,包含一个Fc片段和两个通过二硫键连接的抗原结合Fab片段,形成分子量约为160kDa的二价结构。这种完整结构使其在与抗原结合时具有更高的亲合力,适用于绝大多数免疫检测实验,并且是性价比最高的抗体形式。

其特异性标注为IgG(H+L),这意味着它不仅能识别兔IgG的重链,也能与其轻链结合。由于轻链在不同类和亚类的免疫球蛋白中是共享的,因此该抗体能够与兔的各种IgG亚类,以及其他类型的兔免疫球蛋白发生广泛反应,确保了检测的全面性。

本产品最显著的优势在于其经过严格处理的最小交叉反应性。通过ELISA和/或固相吸附测试,已确保该抗体与牛、鸡、山羊、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、小鼠、大鼠和绵羊的血清蛋白发生交叉反应的风险降至最低。这一特性对于在复杂组织样本(如包含多种细胞或血清成分的样本)中进行实验的研究者至关重要,它能有效避免由非特异性结合导致的高背景,从而获得更清晰、更可靠的特异性信号。当然,它仍有可能与未列出的其他物种免疫球蛋白发生交叉反应,在实验设计中需予以考虑。

 

二、高性能荧光标记:CyanineCy3

该抗体的标记物是CyanineCy3,一种性能优异的橙红色荧光染料。其最大激发波长和最大发射波长分别为550nm和570nm。

 

与传统的四甲基罗丹明相比,Cy3具有更亮、更耐光漂白以及背景更低的显著优势。在应用上,Cy3展现出极高的灵活性:

*兼容传统滤光片:Cy3的激发和发射光谱与TRITC几乎完全相同,因此可以直接使用实验室中常见的TRITC滤光片组进行观察,无需额外配置。

*适配多种光源:它可以被氩离子激光器、氦氖激光器或汞灯有效激发,使其能够广泛应用于流式细胞仪、共聚焦显微镜和荧光显微镜等平台。

*适用于多色标记:Cy3可以与绿色荧光染料进行双标实验,但需注意使用窄带通发射滤光片来收集绿色荧光信号,以最大限度减少Cy3信号的串扰。此外,Cy3也可以与远红色荧光染料(如AlexaFluor 647)配对,用于共聚焦显微镜下的多色标记。不过,文章也建议,若要在绿色与远红色染料之间寻找一个最佳的中间选择,RhodamineRed-X可能是比Cy3更优的方案,因其光谱分离效果更佳。

 

三、高纯度制备与稳定保存方案

该抗体通过免疫亲和层析技术进行纯化,确保了产品的高纯度与高特异性。产品以冻干粉形式提供,应在2-8°C下干燥保存。

使用前,需按照产品说明书加入指定体积的去离子水进行重悬。若溶液不够澄清,建议进行离心处理。重悬后的液体在2-8°C下可作为原液稳定保存约6周。

 

对于长期保存,推荐以下两种策略:

1.分装深冻:将重悬后的抗体分装至小管中,于-70°C或更低的温度下冷冻保存,并严格避免反复冻融。

2.甘油保存:在抗体原液中加入等体积的甘油(最终浓度为50%),然后以液体形态储存于-20°C。

 

自重新水化之日起,产品的有效期为一年。若经测试,抗体在特定应用中的性能仍符合要求,此有效期可适当延长。产品的基础缓冲体系为0.01M磷酸钠和0.25M氯化钠,pH值7.6。其中添加了15mg/ml的无IgG、无蛋白酶牛血清白蛋白作为稳定剂,并含有0.05%的叠氮钠作为防腐剂。

 

四、使用建议与实验优化

产品给出的建议工作稀释度范围是1:100至1:800。然而,必须明确指出,这仅是一个推荐的起始点,最佳的稀释倍数必须通过使用者自身的实验体系进行严谨的经验性确定。

 

影响最终工作浓度的因素繁多,主要包括:

*抗原密度:目标蛋白在样本中的表达水平。

*样本类型与处理方式:是细胞、石蜡切片还是冰冻切片,以及通透处理方法。

*一抗的浓度与孵育条件。

*信号检测设备的灵敏度与配置。

 

因此,为了获得信噪比最优的实验结果,强烈建议研究者在实际应用中,围绕建议范围进行梯度稀释测试,通过预实验来精确校准最适合自身条件的工作浓度。900篇文献中被引用

 

五、产品图片

AlexaFluor488标记驴抗小鼠IgG(H+L)多克隆抗体:高特异性免疫荧光检

 

实验采用源于出生后0-3天(P0-P3)乳鼠的原代混合胶质细胞培养物,并对星形胶质细胞中间丝蛋白GFAP(Sigma G3893)与间隙连接蛋白Connexin 43(Santa Cruz sc-9059)进行了染色。

染色信号通过使用Jackson ImmunoResearch公司的二抗——驴抗小鼠Alexa488(715-546-150)与驴抗兔Cy3(711-165-152)进行可视化显示。

本研究由荷兰神经科学研究所的Carlyn Martina-Mamber与Elly M. Hol完成。

 

六、热门产品

115-005-020

AffiniPure 山羊抗小鼠 IgM,μ链特异性

112-005-167

AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG (H+L)(最小 X 胡,Bov,小时,Ms,Rb Sr Prot)

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AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG + IgM (H+L)

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R-藻红蛋白偶联 AffiniPure 山羊抗人 IgG,Fcγ 片段特异性(min x bov,hrs,Ms Sr Prot)

711-165-152

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115-035-003

过氧化物酶偶联的 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG (H+L)

111-545-003

Alexa Fluor 488 偶联 AffiniPure 山羊抗兔 IgG (H+L)

115-545-003

Alexa Fluor 488 偶联 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG (H+L)

115-035-174

过氧化物酶偶联 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG,轻链* 特异性(最小 x Bov,Gt,Hrs,胡,Rb,大鼠,shp ig)

017-000-121

普通驴精华液

 

艾美捷科技是Jackson的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

 

https://www.amyjet.com/products/711-165-152.shtml

 

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