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Jackson丨艾美捷代理Cy3标记AffiniPure驴抗山羊IgG(H+L)多克隆抗体:特性与应用指南

发布者:艾美捷科技    发布时间:2025-10-22     
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在免疫荧光、免疫组织化学、Western Blot等现代免疫检测技术中,高特异性、高灵敏度的二级抗体是实验成功的关键因素之一。Cy3标记AffiniPure驴抗山羊IgG(H+L)多克隆抗体(货号:705-165-003)便是这样一款经过精心设计与纯化的工具性抗体,广泛应用于以山羊来源的一抗为靶标的检测体系中。本文旨在对该抗体的核心特性、使用规范及应用优势进行系统性的梳理与介绍。

 

Jackson 总部位于美国宾夕法尼的兰卡斯特,距离费城大概有40英里。Jackson在1982年由科学家展开了包括在细胞生物学,蛋白质化学,微生物学,免疫学及产品开发实验研究。 Jackson产品仅用于研究,不用于诊断或治疗用途。作为美国各种二抗生产公司之一,Jackson在各国设有几十家代理。由于其产品效价 高、种类全、价格低廉,因而成为各大药厂、试剂盒生产厂、大型实验室采购此类试剂的优选。其产品主要包括:各种纯化的二抗、标记的二抗(AMCA、 Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、长臂生物素、辣根酶和碱磷酶标记)等。

 

一、核心产品特性

这是一款以驴作为宿主的全分子IgG抗体,通过免疫亲和层析技术纯化而得。其设计目标是特异性识别山羊的免疫球蛋白G。

靶标与特异性: 该抗体主要与山羊IgG的全分子(包括重链H和轻链L)发生反应。此外,它也能识别山羊其他免疫球蛋白的轻链,展现出对轻链的广泛特异性。经过严格的免疫电泳和/或ELISA验证,未检测到其对非免疫球蛋白血清蛋白的交叉反应,这保证了其在复杂样本中检测的特异性。然而,需要注意的是,该抗体可能与其他物种的免疫球蛋白发生交叉反应,这是在实验设计,特别是涉及多物种样本时需要考虑的重要因素。

抗体格式与结构: 本品为全IgG形式。这意味着抗体分子保持了完整的结构,包含一个Fc片段和两个通过二硫键连接的抗原结合Fab片段,因此具有二价结合能力。其分子量约为160 kDa。全IgG抗体形式适用于绝大多数免疫检测流程,并且在成本效益方面具有优势。

克隆性与纯化: 属于多克隆抗体,能够识别抗原的多个表位,通常能提供更强的信号。产品通过将抗原偶联至琼脂糖珠上进行免疫亲和层析纯化,从而确保了高纯度,有效去除了非特异性抗体和其他血清蛋白的干扰。

荧光标记: 抗体与花青素染料Cy3共价偶联。Cy3在橙色-红色荧光染料中表现出众,具有亮度高、光稳定性强、背景荧光低的特点。其最大激发波长和最大发射波长分别为550 nm和570 nm。这一光谱特性与传统的四甲基罗丹明异硫氰酸酯(TRITC)几乎完全一致,因此可以使用标准的TRITC滤光片组在荧光显微镜下进行观察。Cy3可作为TRITC的一种更明亮的替代品。在激光共聚焦显微镜应用中,Cy3可被氩离子激光器(514 nm或528 nm谱线)、氦氖激光器(543 nm谱线)或汞灯(546 nm谱线)有效激发。

 

二、重要警告与使用注意事项

一个关键的警告信息关乎实验的背景信号和抗体效价。产品说明明确指出,牛血清白蛋白(BSA)和脱脂奶粉中可能含有IgG。而本二级抗体(驴抗山羊)能够与牛、羊、马等多种物种的IgG发生反应。因此,若使用BSA或奶粉作为封闭剂或抗体稀释液,其中的牛IgG会与二级抗体结合,从而导致背景信号显著升高,并消耗二级抗体,降低其有效滴度。

为解决这一问题,推荐使用与标记二级抗体宿主物种相同的正常血清进行封闭。具体而言,建议使用5%(v/v)的正常驴血清。这种封闭策略能最大程度地减少由二级抗体非特异性结合引起的背景。

 

三、使用、储存与稳定性指南

物理状态与初始处理: 产品以冻干粉形式提供,应在2-8°C条件下储存。复溶时,请参照产品说明书加入指定体积的超纯水。若复溶后溶液不澄清,可进行离心处理。

工作液制备与短期储存: 工作稀释液应在使用当天新鲜配制。复溶后的未稀释原液在2-8°C下可稳定保存约6周。

长期储存方案: 为确保长期稳定性,建议采取以下两种方案之一:

将复溶后的抗体分装成小份,并于-70°C或更低的温度下冷冻保存,并避免反复冻融。

加入等体积的甘油(ACS级或更高纯度),使其最终浓度为50%,然后以液体形式储存于-20°C。此方法可防止冻结,便于取用。

有效期: 复溶后的抗体有效期为一年。若经测试验证其性能仍符合实验要求,有效期可酌情延长。

缓冲体系: 抗体溶解于pH 7.6的0.01M磷酸钠和0.25M NaCl缓冲液中,并添加了15 mg/ml的无IgG、无蛋白酶牛血清白蛋白作为稳定剂,以及0.05%的叠氮化钠作为防腐剂。

工作浓度建议: 对于大多数应用,推荐的稀释范围在1:100至1:800之间。需要强调的是,最佳稀释度受多种因素影响,如抗原密度、组织或细胞的通透性等。因此,实际操作中必须通过预实验进行经验性优化,以确定特定实验条件下的最适稀释比例。

 

四、在多标实验中的应用策略

Cy3标记的抗体在多重荧光标记实验中J具价值:

与FITC/FAM等绿色荧光染料配对: 在进行双标实验时,虽然Cy3与FITC可以配对使用,但强烈建议为FITC通道使用窄带通发射滤光片,以最大限度地减少Cy3信号在FITC通道中的串色。

与Alexa Fluor 647等远红荧光染料配对: 在共聚焦显微镜下,Cy3亦可与Alexa Fluor 647配对进行多重标记。

更优的多标方案建议: 产品说明中指出,若进行多重标记,Rhodamine Red-X可能是一个比Cy3更佳的选择,因为其荧光发射光谱恰好位于绿色荧光染料(如Alexa Fluor 488)和远红荧光染料(如Alexa Fluor 647)之间,能更有效地进行光谱分离,减少通道间的相互干扰。140篇文献中被引用

Cy3标记AffiniPure驴抗山羊IgG(H+L)多克隆抗体

五、热门产品

705-545-003

Alexa Fluor 488 偶联 AffiniPure 驴抗山羊 IgG (H+L)

111-545-003

Alexa Fluor 488 偶联 AffiniPure 山羊抗兔 IgG (H+L)

115-545-003

Alexa Fluor 488 偶联 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG (H+L)

705-035-147

过氧化物酶偶联的 AffiniPure 驴抗山羊 IgG (H+L) (min x Ck,GP,Sy Hms,Hrs,胡,Ms,Rb,大鼠 Sr Prot)

111-035-003

过氧化物酶偶联 AffiniPure 山羊抗兔 IgG (H+L)

112-035-003

过氧化物酶偶联 AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG (H+L)

115-035-003

过氧化物酶偶联的 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG (H+L)

305-035-003

过氧化物酶偶联 AffiniPure 兔抗山羊 IgG (H+L)

711-095-152

FITC标记驴抗兔IgG(H+L)多克隆抗体

111-095-003

荧光素 (FITC) 偶联的 AffiniPure 山羊抗兔 IgG (H+L)

112-095-003

荧光素 (FITC) 偶联 AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG (H+L)

115-095-003

荧光素 (FITC) 偶联 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG (H+L)

705-165-003

Cy3标记AffiniPure驴抗山羊IgG(H+L)多克隆抗体

711-165-152

Cy3 偶联 AffiniPure 驴抗兔 IgG(H+L)(最小 X Bov,Ck,Gt,GP,Sy Hms,Hrs,胡,Ms,大鼠,Shp Sr Prot)

715-165-150

Cy3 偶联 AffiniPure 驴抗小鼠抗小鼠 IgG (H+L) (min x bov,ck,gt,GP,Sy Hms,Hrs,胡,Rb,Shp Sr Prot)

111-165-003

Cy3 偶联 AffiniPure 山羊抗兔 IgG (H+L)

115-165-003

Cy3 偶联 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG (H+L)

200-582-156

Alexa Fluor 594 偶联 IgG 组分单克隆小鼠抗地高辛

115-005-020

AffiniPure 山羊抗小鼠 IgM,μ链特异性

112-005-167

AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG (H+L)(最小 X 胡,Bov,小时,Ms,Rb Sr Prot)

115-005-044

AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG + IgM (H+L)

713-545-003

Alexa Fluor 488 偶联 AffiniPure 驴抗绵羊 IgG (H+L)

111-035-003

过氧化物酶偶联 AffiniPure 山羊抗兔 IgG (H+L)

109-115-098

R-藻红蛋白偶联 AffiniPure 山羊抗人 IgG,Fcγ 片段特异性(min x bov,hrs,Ms Sr Prot)

711-165-152

Cy3 偶联 AffiniPure 驴抗兔 IgG(H+L)(最小 X Bov,Ck,Gt,GP,Sy Hms,Hrs,胡,Ms,大鼠,Shp Sr Prot)

017-000-121

普通驴精华液

001-000-162

牛血清白蛋白(无 IgG、无蛋白酶)

115-035-003

过氧化物酶偶联的 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG (H+L)

211-032-171

过氧化物酶偶联 IgG 组分单克隆小鼠抗兔 IgG,轻链特异性(min x bov,gt,arm hms,hrs,胡,ms,大鼠,shp ig)

115-035-003

过氧化物酶偶联的 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG (H+L)

111-545-003

Alexa Fluor 488 偶联 AffiniPure 山羊抗兔 IgG (H+L)

115-545-003

Alexa Fluor 488 偶联 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG (H+L)

115-035-174

过氧化物酶偶联 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG,轻链* 特异性(最小 x Bov,Gt,Hrs,胡,Rb,大鼠,shp ig)

 

艾美捷科技是Jackson的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。


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