BPS Bioscience PDE4D基于细胞的报告基因检测试剂盒产品数据和文献参考

磷酸二酯酶 (PDE) 在 cAMP 和 cGMP 信号传导的动态调节中发挥着重要作用。PDE4D 具有 3',5'-环状 AMP 磷酸二酯酶活性并降解 cAMP。PDE4D 抑制剂对 PDE4D 活性的抑制导致细胞内 cAMP 水平升高。PDE4D 基因编码至少 9 种不同的亚型，并与中风、哮喘、心律失常和心肌病有关，使其成为重要的治疗靶点。

基于PDE4D 细胞的活性测定旨在筛选培养细胞中的 PDE4D7 抑制剂。该测定基于用 CRE 荧光素酶报告基因转染细胞。CRE 报告基因包含受 cAMP 反应元件 (CRE) 控制的萤火虫荧光素酶基因。细胞内 cAMP 升高会激活 CRE 结合蛋白 (CREB) 与 CRE 结合并诱导荧光素酶的表达。在细胞生理学研究中，毛喉素通常用于提高细胞内 cAMP 水平。当瞬时转染CRE报告基因的细胞被毛喉素激活时，细胞内cAMP水平上调，从而诱导CRE荧光素酶报告基因的表达。然而，当细胞用 PDE4D7 表达载体和 CRE 报告基因共转染时，毛喉素诱导的 cAMP 水平降低，导致荧光素酶表达水平降低。当细胞用 PDE4D 抑制剂处理以抑制 PDE4D7 活性时，cAMP 水平恢复，从而导致更高的荧光素酶活性。

艾美捷PDE4D基于细胞的报告基因检测试剂盒：

货号：60505

英文名称：PDE4D Cell-Based Reporter Assay Kit

规格：500 rxns.

同义词：PDE4D、磷酸二酯酶 4D、PDE4D 细胞活性测定试剂盒、细胞测定试剂盒、细胞测定、报告基因测定试剂盒

提供方式：该试剂盒包括 CRE 荧光素酶报告基因（与组成型表达的海肾（海三色堇）荧光素酶载体预混合，作为转染效率的内部对照）和 PDE4D7 表达载体

需要但未提供的材料：

? 哺乳动物细胞系和适当的细胞培养基

? 96 孔组织培养处理的白色透明底测定板（Corning # 3610）

? 哺乳动物细胞系转染试剂

? Opti-MEM I 低血清培养基 (Invitrogen #31985-062)

? Forskolin (Sigma Aldrich #F3917)

? 两步荧光素酶（Firefly 和 Renilla）检测系统：

两步荧光素酶(Firefly & Renilla) 检测系统 (BPS Bioscience, #60683)：该系统直接在生长培养基中检测细胞。它可以与任何光度计一起使用。不需要自动注射器。

? 光度计

PDE4D基于细胞的报告基因检测试剂盒数据：

PDE4D基于细胞的报告基因检测试剂盒文献参考：

1. Montminy MR et al. (1987). Nature  328(6126):175-178

2. Fan Chung, K. (2006). Eur. J. Pharmacol.  533(1-3):110-117

3. Malik, R. et al. (2008). Appl. Microbiol. Biotechnol. 77(5): 1167-1173

BPS bioscience总部坐落于世界最大之一的美国圣地亚哥生命科学研究机构和公司集中地的中心。公司主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶。BPS公司为药物研发用重组酶类的提供了最大选择之一。