血浆/血清循环与外泌体RNA纯化试剂盒：有效去除PCR抑制剂，洗脱体积灵活

一、概述

循环游离RNA和外泌体RNA作为液体活检的重要分析对象，在肿瘤早期筛查、产前诊断及多种疾病标志物发现中具有广阔应用前景。然而，血浆和血清样本中RNA含量极低（多数片段短于1000 nt，其中miRNA仅约21 nt），且存在大量蛋白质、脂质和PCR抑制物，对提取纯化技术提出了高灵敏度、高纯度和无偏倚的要求。

由艾美捷代理的Norgen Biotek公司推出的血浆/血清循环与外泌体RNA纯化试剂盒（浆液系列）（货号：42800）基于专利树脂基质，提供了一种快速、可靠、简便的解决方案。该系列包括三种规格：基础浆液规格（0.25–5 mL样本）、高通量96孔板规格（适用于真空或离心处理）以及Maxi浆液规格（2–5 mL大体积样本）。所有试剂盒均无需使用酚或氯仿，可无偏倚地分离包括microRNA在内的全部RNA片段，洗脱体积灵活可调，纯化产物可直接用于小RNA测序等下游应用。

二、产品特性与优势

1. 全面覆盖各类RNA分子

该试剂盒能够分离所有尺寸的循环RNA和外泌体RNA，包括：

长链RNA（<1000 nt）

短链RNA（如microRNA，约21 nt）

外泌体包裹的RNA

无论RNA的GC含量或大小差异，均能实现无偏倚的结合与洗脱，确保下游定量和分析结果的真实性。

2. 样本体积灵活，浓缩效率高

支持血浆或血清样本体积范围：

基础浆液规格：0.25 mL – 5 mL

96孔板规格：适配高通量自动化或手动操作

Maxi浆液规格：2 mL – 5 mL

通过优化洗脱体积，可将微量RNA浓缩至小体积（通常10–50 uL），显著提高检测灵敏度。

3. 无抑制剂残留，下游兼容性强

纯化后的RNA被洗脱至与多种下游应用兼容的溶液中，包括：

PCR及实时荧光定量PCR（qPCR）

甲基化敏感性逆转录qPCR

逆转录PCR（RT-PCR）

Northern blotting

RNase保护分析及引物延伸

表达芯片分析

二代测序（包括小RNA测序）

该试剂盒可有效去除样本中的PCR抑制剂（如血红素、免疫球蛋白、肝素等），无需额外纯化步骤。

4. 专有树脂基质与浆液格式优势

纯化基于Norgen的专有树脂基质。与传统离心柱或磁珠法相比，浆液格式具有独特优势：

无需延长管：对于大体积样本（如5 mL），浆液格式可直接在标准离心管或管组中操作，无需使用特殊的延长管或转接器。

操作灵活：既可采用离心法，也可配合真空 manifold 处理96孔板。

无酚/氯仿：全程不使用有机溶剂，安全环保。

5. 样本类型与抗凝剂要求

适用样本：新鲜或冻存的血浆、血清。

抗凝剂：仅限EDTA或枸橼酸钠处理的血液样本制备的血浆。严禁使用肝素抗凝的血浆，因为肝素会严重干扰RT-PCR等多种下游应用。

兼容采血管：与Streck Cell-Free RNA BCT?管兼容，可在常温下稳定样本中的游离RNA。

三、产品规格与选型指南

产品规格 | 样本体积范围 | 通量 | 操作方式 | 适用场景

血浆/血清循环和外泌体RNA纯化试剂盒（基础浆液） | 0.25 – 5 mL | 单次或少量样本 | 离心 | 常规科研、预实验、小规模临床研究

96孔板纯化试剂盒（高通量浆液） | 适配96孔板 | 高通量（96个样本/板） | 真空 manifold 或离心 | 大规模筛选、队列研究、自动化平台

Maxi浆液纯化试剂盒 | 2 – 5 mL | 单次大体积 | 离心 | 样本量充足、需要高产量RNA的研究

选择建议：

当样本体积>5 mL或需要处理大量样本时，推荐使用96孔板格式。

若需从2–5 mL血浆/血清中获得最大RNA产量，选择Maxi规格。

常规0.25–2 mL样本，基础浆液规格即可满足需求。

四、储存条件与稳定性

储存温度：所有溶液应紧密密封，室温（15–25℃）储存。

有效期：自运输之日起，试剂盒稳定期为2年。

沉淀处理：若任何溶液出现盐沉淀，使用前于60℃加热20分钟并充分混匀。请注意，浆液C2中含有灰色树脂，加热后不会溶解，此为正常现象。

五、下游应用示例

小RNA测序：从1 mL血浆中提取的RNA可直接用于文库构建，检测循环miRNA的表达谱。

肿瘤标志物检测：定量分析血浆中特定mRNA或miRNA的水平，用于癌症早期诊断或治疗监测。

产前诊断：检测孕妇血清中胎儿来源的游离RNA（如PLAC4、RASSF1A等），用于非侵入性产前筛查。

外泌体研究：结合外泌体分离后，分析外泌体携带的RNA在细胞间通讯中的作用。

六、产品图示

图：不同体积血浆中循环RNA的分离与检测。使用Norgen的血浆/血清循环RNA纯化试剂盒（小型浆液规格），从0.5 mL、1 mL和2 mL血浆中分离循环RNA。取3 uL纯化后的RNA作为模板，进行RT-qPCR反应，检测人5S基因。在所有血浆样本体积中均检测到5S看家基因。5S rRNA的扩增结果显示，随着样本输入体积的增加，RNA量也随之增加，这表现为Ct值随样本体积增大而降低。从0.5 mL血浆中分离的RNA以红线表示，从1 mL血浆中分离的RNA以绿线表示，从2 mL血浆中分离的RNA以蓝线表示。黑线对应无模板对照。