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Transcreener ADO CD73检测试剂盒,单次添加,混合即读

发布者:艾美捷科技    发布时间:2026-08-12     
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在肿瘤免疫与嘌呤能信号转导研究领域,CD73(胞外-5'-核苷酸酶)已成为备受关注的治疗靶点。CD73与CD39协同作用,将细胞外的ATP经AMP最终水解为腺苷(Adenosine, ADO)。腺苷在肿瘤微环境中具有强烈的免疫抑制作用,能够抑制T细胞和NK细胞的活性,从而帮助肿瘤实现免疫逃逸。因此,开发高效、选择性好的CD73抑制剂,已成为肿瘤免疫治疗的重要方向之一。而实现这一目标的关键前提,便是能够精准、可靠地测定CD73的酶活性。

 

针对传统检测方法操作繁琐、通量受限、易受化合物干扰等痛点,基于直接检测终产物腺苷的单步CD73活性检测法(如Transcreener技术平台)提供了一套高效、稳健且易于自动化的解决方案--由艾美捷代理BellBrook推出的Transcreener ADO CD73检测试剂盒(货号:3026-1K)。该方法以“单次添加、混合即读”的极简操作,实现了从酶学表征到高通量筛选(HTS)的无缝衔接,为靶向CD73的药物发现项目提供了可靠的技术支撑。

 

核心优势:单步操作、抗干扰强、数据稳健

该检测体系的核心设计在于通过偶联酶将CD73生成的腺苷(ADO)转化为AMP和ADP,进而利用成熟的Transcreener ADP?检测体系进行定量。这一设计思路在保留直接检测法高特异性的同时,充分继承了Transcreener平台的技术优势:

1. 真正的“单次添加”操作流程:实验流程被极致精简——完成酶促反应后,仅需单次添加检测试剂即可进行读数。无需洗涤、转移、终止或多次加液等繁琐操作,不仅大幅减少了人为误差和操作时间,更使其对自动化HTS平台极为友好,能够轻松实现高通量下的稳健运行。

2. 远红外示踪剂,有效降低干扰:该技术采用远红外荧光示踪剂,有效避开了短波长区域的信号干扰。这一设计显著减少了化合物库中自带荧光的分子或反应体系中的光散射对检测结果的负面影响,从而降低假阳性率,提高筛选数据的可信度。对于筛选大规模、多样性的化合物库而言,这一优势尤为关键。

3. 卓越的数据质量与稳定性:在高通量筛选场景中,数据质量是决定成败的核心因素。该检测体系在HTS条件下,其Z'因子值可稳定达到0.7以上。Z'因子是衡量HTS方法可靠性的黄金标准,高于0.5即视为优秀,而该体系稳定达到0.7以上,充分证明了其能够有效区分真实抑制剂信号与背景波动,确保筛选结果的可靠性。

 

技术原理与适用范围

该检测技术的实现依赖于一套精巧的偶联酶-竞争性免疫检测体系:CD73水解AMP生成腺苷(ADO),偶联酶将ADO进一步转化为ADP,随后使用特异性识别ADP(而不识别ATP)的抗体与远红外荧光示踪剂进行检测。反应产生的ADP会与示踪剂竞争结合抗体,通过荧光偏振(FP)产生可量化的信号变化,最终实现对CD73酶活性的精确测定。

 

需要明确的是,该试剂盒提供的是完整的检测试剂,并不包含CD73酶本身。其设计初衷是用于纯化的酶制剂活性检测,并未针对细胞裂解液、血清或其他生物样本进行验证。因此,它最适用于重组CD73酶的动力学研究及抑制剂的筛选与表征。

 

超越试剂盒:完整的药物发现服务

除了提供高质量的检测试剂盒,该平台还延伸至全方位的药物发现服务。对于希望加速项目进程但暂无条件在内部建立检测体系的研究团队,专业科学家团队可提供包括:

抑制剂筛选:针对CD73靶点进行化合物活性确认;

抑制剂Potency谱分析:通过剂量-反应曲线快速获得IC??结果,并可扩展至相关蛋白的选择性分析;

滞留时间测定:利用“跳跃稀释”酶学方法测定解离速率常数(k_off),评估药物-靶点复合物的稳定性;

作用机制研究:通过动力学分析明确抑制模式(竞争性、非竞争性或混合型抑制)。

 

这些服务能够帮助研发团队在无需内部配备高端筛选设备与资深酶学专家的前提下,高效推进项目从靶点验证到先导化合物优化的关键阶段。

 

总而言之,单步CD73活性检测法以其操作极简(单次添加)、抗干扰性强(远红外示踪)、数据稳健(Z'>0.7)及高通量适配性高四大特点,为CD73靶点的药物发现提供了高效、可靠的技术工具。结合其灵活的试剂盒供应与专业的定制化服务,该平台能够满足从基础酶学表征到大规模高通量筛选的多样化需求,是加速CD73相关新药研发进程的务实之选。


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