阿尔茨海默病(AD)最早由德国神经病理学家 A. Alzheimer 于 1907 年报道,是痴呆的主要原因之一。关于其发病机制,“淀粉样级联假说”得到广泛支持:脑内 β-淀粉样肽(Aβ)的沉积触发神经元死亡。Aβ 由 β-分泌酶和 γ-分泌酶先后切割膜蛋白——淀粉样前体蛋白(APP,含 695、751 或 770 个氨基酸)而产生。由于 β-分泌酶切割后生成的可溶性 APPβ(sAPPβ)与 Aβ 的生成量直接相关,因此建议同时检测 sAPPβ 与 Aβ。
另一方面,APP 的正常代谢途径通常由 α-分泌酶先切割,产生可溶性 APPα(sAPPα),再由 γ-分泌酶切割生成 P3 片段。目前阿尔茨海默病药物研发主要基于淀粉样级联假说,尤其关注通过调控分泌酶活性来抑制 Aβ 的生成。因此,在研究或评估分泌酶抑制剂时,同时检测 sAPPα、sAPPβ 与 Aβ 具有重要意义。
本试剂盒仅用于检测小鼠样本中的可溶性sAPPβ。
艾美捷IBL-小鼠sAPPβ-w检测试剂盒:
货号:27416-96Well
预期用途:仅供研究使用
检测方法:ELISA
标记酶:HRP
种属:小鼠
可测样本:血浆、细胞培养上清
检测范围:13–800 pg/mL
第一步反应:2–8 ℃ 过夜
第二步反应:2–8 ℃ 60 分钟
灵敏度:2.87 pg/mL
特异性:与小鼠 sAPPα 交叉反应 <1 %
储存条件:2–8 ℃
有毒有害物质:不适用
卡塔赫纳议定书:不适用
检测服务:不提供
包装规格:96 孔板 ×1
※“预期用途”栏中注明为“研究试剂”的产品不能使用用于诊断或任何医疗目的。
※本页所列数据表仅为示例。
试剂盒组成:
1. 预包被微孔板:抗 sAPPβ-w 兔 IgG,96 孔 ×1
2. 标记抗体浓缩液(30×):HRP 标记抗小鼠 N-APP 兔 IgG Fab',0.4 mL ×1
3. 标准品:重组小鼠 sAPPβ-w,0.5 mL ×2
4. EIA 缓冲液,30 mL ×1
5. 标记抗体稀释液,12 mL ×1
6. 显色底物:TMB 溶液,15 mL ×1
7. 终止液,12 mL ×1
8. 浓缩洗涤液,50 mL ×1
检测原理:
本试剂盒采用固相夹心 ELISA。微孔板已包被捕获抗体,加入样本及标准品进行第一次反应;反应后,加入 HRP 标记的检测抗体进行第二次反应。洗去未结合的抗体后,加入四甲基联苯胺(TMB)显色。
结果计算:
1. 以标准品浓度为横坐标、吸光度(O.D.)为纵坐标绘制标准曲线,可采用二次回归或双对数转换等合适模型。
2. 将样本吸光度代入标准曲线读取浓度。
3. 将所得浓度乘以样本稀释倍数,即为最终浓度。
文献参考:
1. Selkoe DJ. Normal and abnormal biology of the beta-amyloid precursor protein.Annu Rev Neurosci. 1994;17:489-517.
2. Citron M, Oltersdorf T, Haass C, McConlogue L, Hung AY, Seubert P, Vigo Pelfrey C, Lieberburg I, Selkoe DJ. Mutation of the beta-amyloid precursor protein in familial Alzheimer's disease increases beta-protein production. Nature.1992 Dec 17;360(6405):672-4.
3. Hsiao K, Chapman P, Nilsen S, Eckman C, Harigaya Y, Younkin S, Yang F,Cole G. Correlative memory deficits, Abeta elevation, and amyloid plaques in transgenic mice. Science. 1996 Oct 4;274(5284):99-102.
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