该套装的灵敏度允许在多种情况下测定低水平的ATP,前提是不需要降解体细胞中的ATP:
1. 液体(例如饮用水、工艺用水、饮料和啤酒)的细菌学控制
2. 药品和化妆品
3. 细胞对表面的黏附
4. 洗衣质量保证
5. 细菌生长
6. 抗生素对细菌的影响
艾美捷丨BioThema-细胞内ATP检测套装HS(#266-111)用于测定活细胞中的细胞内ATP(三磷酸腺苷)。样本中的细胞外ATP会被酶降解。如果样本中还含有体细胞,并且目的是测定微生物ATP,我们推荐使用266-112微生物ATP检测套装,其中包含适用于大多数动物细胞的细胞裂解试剂。如果样本中只有一种类型的细胞且没有细胞外ATP,可以使用266-311 ATP生物量检测套装。
所有活细胞都含有ATP,它在不同细胞过程中充当能量货币的角色。当细胞因自然原因死亡时,ATP通常会被降解。
细胞内ATP浓度在所有类型的细胞中都被仔细调节到相似水平。因此,ATP是细胞内总体积的良好估计。大多数细菌细胞每个细胞含有约2×10-18摩尔ATP,而大多数真核细胞由于体积较大,含有10-15摩尔ATP或更多。
ATP生物量检测套装HS、细胞内ATP检测套装HS和微生物ATP检测套装HS含有高灵敏度的ATP试剂HS,其荧光素酶活性很高。ATP试剂HS中的荧光素酶活性实际上如此之高,以至于如果在复溶过程中受到污染,它将在每38分钟内将ATP背景降低一个数量级。在将样本与ATP试剂HS混合后,光强度每分钟衰减约6%。
这种衰减速度足够慢,可以进行手动混合,并且可以使用没有试剂分配器的试管发光仪。该试剂的检测限为10×10???摩尔ATP(使用灵敏的发光仪)。这相当于5个细菌细胞。这里必须区分细菌细胞和CFU,因为一个CFU可能由多个细胞组成。如果检测限不够,可以通过微滤浓缩样本,这一过程也可以去除大部分细胞外ATP。
任何试管或微孔板发光仪都可以使用。需要注意的是,试管发光仪比微孔板发光仪灵敏度高一个数量级。如果使用微孔板发光仪,它应至少有两个分配器,并能够混合微孔板。
任何试管或微孔板发光仪都可以使用。需要注意的是,试管发光仪比微孔板发光仪灵敏度高一个数量级。如果使用微孔板发光仪,它应至少有两个分配器,并能够混合微孔板。
详细的实验步骤可以在随套装附带的“使用说明”中找到。
BioThema致力于萤火虫荧光素酶反应的分析应用。这种多功能反应已广泛用于各种检测,包括细胞数量定量、细胞增殖、细胞毒性、参与ATP形成或降解反应的所有酶和代谢物分析、报告基因检测、免疫检测、快速细胞计数和环境卫生监测。
艾美捷科技是BioThema的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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