由于组织样本较难裂解,包括脂肪组织和坚韧的纤维组织(如肌腱或韧带)等,为DNA提取的第一步带来巨大挑战。传统的样本破裂或酶消化方法可能无法完全裂解这些样本。SPINeasy DNA Kit for Tissue (With Lysing Matrix)可在30分钟内从各种类型的组织样本中提取出高质量的基因组DNA。样品通过珠磨法与裂解介质M 和缓冲液 TD1 一起快速破碎,推荐使用 MP Biomedicals的 FastPrep?样品制备仪进行组织破碎,以获得最佳产量。裂解缓冲液含有蛋白酶K,可在短短 10 分钟的孵育过程中完全溶解样本。本试剂盒采用机械裂解、化学裂解以及酶裂解相结合的方法,与其他不使用机械裂解的试剂盒相比,提取的DNA产量会显著提高。这种经优化的高效裂解方法,对于一些较难裂解的样本,如韧性大的(啮齿动物尾巴、耳片)和富含纤维的(心脏、肌肉)组织也能够有效裂解。裂解缓冲液中还含有 RNase A,可将 RNA 污染的可能性降至最低。从各种类型的组织中提取的基因组DNA,不含有PCR抑制物,可立即应用于下游实验,如长片段PCR、qPCR、限制性内切酶消化和测序等。
作为MP Biomedicals全国总代理,艾美捷科技强烈推荐MP Biomedicals热销产品SPINeasy 组织基因组DNA提取试剂盒,含裂解介质。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
SPINeasy 组织基因组DNA提取试剂盒,含裂解介质 | 116558050 | 查看 |
SPINeasy 组织基因组DNA提取试剂盒,含裂解介质组分:
缓冲液P1(50 mL)
缓冲液P1HA(50 mL)
缓冲液P2(40 mL)
缓冲液P3(40 mL)
缓冲液P4(6 mL)
P离心柱(50个)
2.0 mL收集管(100个)
1.5 mL收集管(50个)
危险性声明:危险品第8类
包装规格:50次提取
个人防护装备:安全护目镜/面罩;手套
样本类型:25 - 200 uL DNA制备样本(片段长度>200 bp)
储存条件:在室温(15-25℃)干燥环境中保存。
使用说明:仅供研究使用(RUO)。
图1. 使用SPINeasy DNA Kit for Tissue (With Lysing Matrix)和竞品Q kit从不同类型的组织样本中提取DNA,比较其产量和质量。提取不同类型组织样本(各15 mg)的DNA,用分光光度计测定了DNA的产率和纯度(A260/280和A260/230)。使用Agilent 4150 TapeStation分析获得的虚拟凝胶以及DNA完整值(DIN,绿色和黄色标记)。
图 2. 使用SPINeasy DNA Kit for Tissue (With Lysing Matrix)提取的DNA可直接用于PCR扩增。
上图:使用SPINeasy DNA Kit for Tissue (With Lysing Matrix)从兔子和小鼠的不同类型组织样本中提取基因组DNA,使用兔子和小鼠的特异性α-actin引物(1kb)扩增提取的gDNA(1 μL),通过琼脂糖凝胶电泳分析扩增结果。采用无DNA模板的反应体系作为阴性对照(NC)。
下图:以等量的鸡肝、牛肉和鱼鳃gDNA(25 ng)作为模板,采用SYBR green进行qPCR扩增,比较循环数阈值(Ct)。
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