Jackson丨艾美捷代理AlexaFluor488标记山羊抗小鼠IgG(H+L)多克隆抗体：特性、应用与操作指南

发布者：艾美捷科技发布时间：2025-10-21

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在生命科学研究和临床诊断领域，特异性强、灵敏度高的抗体是进行免疫学检测，尤其是免疫荧光实验的关键工具。AlexaFluor488标记山羊抗小鼠IgG(H+L)多克隆抗体（货号：115-545-003）便是一款经过精心设计与纯化的次级抗体，广泛应用于以小鼠源性一抗为核心的多种检测体系中。本文旨在对该抗体的核心特性、应用范围及操作规范进行系统性的梳理与介绍。

Jackson 总部位于美国宾夕法尼的兰卡斯特，距离费城大概有40英里。Jackson在1982年由科学家展开了包括在细胞生物学，蛋白质化学，微生物学，免疫学及产品开发实验研究。 Jackson产品仅用于研究，不用于诊断或治疗用途。作为美国各种二抗生产公司之一，Jackson在各国设有几十家代理。由于其产品效价高、种类全、价格低廉，因而成为各大药厂、试剂盒生产厂、大型实验室采购此类试剂的优选选。其产品主要包括：各种纯化的二抗、标记的二抗（AMCA、 Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、长臂生物素、辣根酶和碱磷酶标记）等。

一、核心特性与靶向特异性

此抗体来源于山羊，其靶标为小鼠的免疫球蛋白G。它属于“全分子IgG”抗体，这意味着其结构完整，包含一个Fc片段和两个通过二硫键连接的抗原结合Fab片段，形成了分子量约为160kDa的二价结构。这种完整的结构使其适用于绝大多数常规免疫检测实验，并且在成本效益上具有优势。

其“特异性”标注为“IgG(H+L)”，这是一个至关重要的特性。它不仅能够与小鼠IgG的重链（H）发生反应，也能与其轻链（L）结合。由于不同类和亚类的免疫球蛋白（如IgM,IgA等）共享相同或相似的轻链，因此该抗体除了能与小鼠的各类IgG亚型结合外，还能识别小鼠其他含有相同轻链的免疫球蛋白，例如IgM和IgA。这种广泛的反应性使得研究人员在实验中无需针对不同类别的小鼠抗体更换不同的次级抗体，大大提高了实验的灵活性和便捷性。

经过免疫电泳和/或ELISA方法的验证，该抗体仅与小鼠免疫球蛋白发生特异性反应，未检测到针对非免疫球蛋白血清蛋白的抗体活性，确保了其在复杂生物样本中应用的低背景和高信噪比。需要注意的是，由于不同物种间免疫球蛋白可能存在同源性，该抗体存在与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应的可能性，在实际应用中需予以考虑。

二、高纯度制备与稳定保存

为保证抗体的性能，其纯化过程采用了高特异性的免疫亲和层析法。通过将抗原固定在琼脂糖珠上，能够从抗血清中高效、特异地分离出目标抗体，从而获得高纯度的产物。

该抗体以冻干粉的形式提供，这是一种利于长期稳定的物理状态。未重新溶解的冻干粉应在2-8°C条件下储存。在使用前，需按照产品说明书指定的体积加入去离子水进行重悬。若溶液不够澄清，可进行离心处理。重悬后的抗体原液在2-8°C下可稳定保存约6周。

对于更长期的保存，建议采取以下两种策略之一：

1.分装冻存：将重悬后的抗体分装到小管中，于-70°C或更低的温度下冷冻保存，并严格避免反复冻融。

2.甘油保存：在抗体原液中加入等体积的甘油（最终浓度为50%），然后以液体形态储存于-20°C。

无论采用何种保存方式，自重新水化之日起，产品的有效期为一年。若经测试，抗体在特定应用中的性能仍符合要求，此有效期可适当延长。

产品的基础缓冲体系为0.01M磷酸钠和0.25M氯化钠，pH值7.6。为了维持抗体的稳定性与活性，其中添加了15mg/ml的无IgG、无蛋白酶牛血清白蛋白作为稳定剂，并含有0.05%的叠氮钠作为防腐剂，以抑制微生物生长。

三、高效荧光标记物：AlexaFluor488

该抗体的标记物为AlexaFluor488，这是一种性能优异的绿色荧光染料。其最大激发波长和最大发射波长分别为493nm和519nm。

与传统的荧光标记物如FITC、Cy2和DyLight488相比，AlexaFluor488在水性封片剂中表现出更高的荧光亮度和光稳定性，同时其荧光信号对pH变化的敏感性更低。这些特性使得AlexaFluor488标记的抗体能够为所有需要绿色荧光信号的免疫荧光实验（如细胞成像、组织切片染色、流式细胞术等）提供更高的检测灵敏度。的例外是那些需要使用塑料封片剂的实验方案，因为某些有机溶剂可能会影响AlexaFluor488的性能。

四、使用建议与操作要点

在实际应用中，该抗体的建议工作稀释度范围在1:100至1:800之间。需要特别强调的是，这个范围仅为参考起点，最佳的稀释倍数必须通过实验进行经验性确定（即进行滴度测试）。

影响最佳稀释度的因素众多，包括但不限于：

抗原密度：样本中目标抗原的丰度。

样本通透性：抗体能否有效到达细胞内抗原。

样本类型：细胞涂片、组织切片（石蜡包埋或冰冻）或流式细胞术样本。

一抗的种类和浓度。

检测系统的灵敏度。

因此，为了获得信噪比最佳、特异性最强的实验结果，强烈建议研究人员针对自己的实验体系，设置一系列不同稀释度的抗体进行预实验，以找到最适合自身条件的工作浓度。

五、产品引用次数：388

115-545-003

六、热门产品：

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111-585-003	Alexa Fluor 594 偶联 AffiniPure 山羊抗兔 IgG （H+L）
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111-035-003	过氧化物酶偶联 AffiniPure 山羊抗兔 IgG （H+L）
112-035-003	过氧化物酶偶联 AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG （H+L）
115-035-003	过氧化物酶偶联的 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG （H+L）
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111-095-003	荧光素（FITC）偶联的 AffiniPure 山羊抗兔 IgG （H+L）
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115-165-003	Cy3 偶联 AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG （H+L）
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112-005-167	AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG （H+L）（最小 X 胡，Bov，小时，Ms，Rb Sr Prot）
115-005-044	AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG + IgM （H+L）