在免疫学检测领域,尤其是在免疫沉淀后WesternBlotting(IP-WB)等精细实验中,选择一款能够精准识别目标蛋白且背景干扰J低的二级抗体至关重要。过氧化物酶标记的AffiniPure?山羊抗小鼠IgG(轻链特异性)多克隆抗体正是为此而设计的一款高性能工具。它结合了独特的轻链特异性、经过严格验证的低交叉反应性以及灵敏的辣根过氧化物酶标记,为研究人员提供了可靠且高效的检测方案。过氧化物酶标记AffiniPure山羊抗小鼠IgG(轻链特异性)抗体(货号:115-035-174),成为高端、精密免疫检测实验中常用的高纯度基础试剂。
Jackson 总部位于美国宾夕法尼的兰卡斯特,距离费城大概有40英里。Jackson在1982年由科学家展开了包括在细胞生物学,蛋白质化学,微生物学,免疫学及产品开发实验研究。 Jackson产品仅用于研究,不用于诊断或治疗用途。作为美国各种二抗生产公司之一,Jackson在各国设有几十家代理。由于其产品效价 高、种类全、价格低廉,因而成为各大药厂、试剂盒生产厂、大型实验室采购此类试剂的优选。其产品主要包括:各种纯化的二抗、标记的二抗(AMCA、 Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、长臂生物素、辣根酶和碱磷酶标记)等。
一、核心特性与优势
1.精准的轻链特异性
本品显著的特点是能够特异性识别小鼠免疫球蛋白的轻链。经过抗原结合实验、WesternBlotting和/或ELISA验证,该抗体主要与小鼠IgG的κ轻链反应,同时也能识别其他小鼠免疫球蛋白(如IgM、IgA等)所共有的轻链。关键在于,它不识别小鼠IgG的重链(Fc段)。这一特性使其成为IP-WB实验的理想选择:当使用小鼠源性的IgG进行免疫共沉淀时,用于沉淀靶蛋白的一抗(小鼠IgG)的重链和轻链都会在凝胶上显现。若使用针对重链的二级抗体,会同时检测到约50kDa的重链(~50kDa)和25kDa的轻链(~25kDa),而轻链特异性抗体则只检测轻链,从而在印迹上只显示清晰的轻链条带,有效避免了沉淀抗体重链对目标蛋白信号的遮蔽和干扰。
2.J低的交叉反应性
本品通过ELISA进行严格测试与吸附处理,确保与牛、山羊、马、人、兔、大鼠和绵羊的免疫球蛋白仅有J微小的交叉反应。这种广泛的种属交叉反应性测试,J大地降低了在复杂样本体系(如含有血清的细胞培养物或组织裂解液)中因非特异性结合而产生高背景的风险,保证了检测结果的特异性与准确性。
3.高效的酶标记形式
抗体与辣根过氧化物酶(HRP)通过改良的Nakane和Kawaoi方法进行偶联。HRP是一种广泛应用于免疫组化/细胞化学(IHC/ICC)、WesternBlotting和ELISA的报告酶。它能催化多种底物产生显色或化学发光信号,灵敏度J高。
4.经典的抗体格式
本品为全分子IgG,通过免疫亲和层析从抗血清中纯化而得。其完整的二价结构(含Fc段和两个Fab段)确保了高亲和力与稳定性,分子量约为160kDa。
二、应用与使用指南
1.应用范围与推荐稀释度
该抗体用途广泛,但其设计类别明确指向“用于IP后WesternBlotting的抗轻链特异性抗体”。以下是建议的起始稀释范围,实际使用时需根据具体实验条件进行优化:
免疫组织/细胞化学(IHC/ICC):1:500-1:5,000
ELISA及使用显色底物的WesternBlotting:1:5,000-1:100,000
使用ECL化学发光底物的WesternBlotting:1:10,000-1:200,000(此范围表明其具有J高的灵敏度和信号强度)
2.储存、复溶与稳定性
物理状态:冻干粉。应在2-8°C干燥储存。
复溶:按说明书加入指定体积的超纯水复溶,若不清澈可离心。工作液需当日配制。
短期储存:复溶后原液在2-8°C可稳定约6周。
长期储存:为保持HRP活性,建议:
*分装后于-70°C或更低温度冷冻,避免反复冻融。
*或加入等体积甘油(终浓度50%)于-20°C保存。
有效期:复溶后一年,经测试合格可延长。
3.关键注意事项
不含防腐剂:产品特别注明未添加叠氮钠,因为叠氮钠会严重抑制HRP的酶活性。用户在稀释或保存时也需避免接触此类物质。
缓冲体系:含15mg/ml的无IgG、无蛋白酶牛血清白蛋白作为稳定剂,溶解于pH7.6的磷酸钠缓冲盐水中。
三、480篇引用文献

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