Jackson丨艾美捷代理AffiniPure山羊抗小鼠IgM(u链特异性)：特性与应用指南

在免疫学研究中，特异性识别免疫球蛋白M(IgM)这一在初次免疫应答中率先产生的关键抗体，对于理解B细胞激活、自身免疫性疾病及感染早期过程至关重要。AffiniPure山羊抗小鼠IgM(u链特异性)（货号：115-005-020）便是一款经过精心设计与纯化的高特异性工具，能够精准地用于检测小鼠来源的IgM分子。本文旨在系统介绍该抗体的核心特性、应用优势、使用规范及相关的实验证据。

Jackson 总部位于美国宾夕法尼的兰卡斯特，距离费城大概有40英里。Jackson在1982年由科学家展开了包括在细胞生物学，蛋白质化学，微生物学，免疫学及产品开发实验研究。 Jackson产品仅用于研究，不用于诊断或治疗用途。作为美国各种二抗生产公司之一，Jackson在各国设有几十家代理。由于其产品效价 高、种类全、价格低廉，因而成为各大药厂、试剂盒生产厂、大型实验室采购此类试剂的优选。其产品主要包括：各种纯化的二抗、标记的二抗（AMCA、 Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、长臂生物素、辣根酶和碱磷酶标记）等。

一、核心产品特性：卓越的特异性与经典格式

本品是一款以山羊作为宿主的全分子IgG抗体，其设计核心在于特异性靶向小鼠IgM分子的重链。

靶标与特异性：该抗体的最大特点在于其u链特异性。这意味着它通过免疫电泳和/或ELISA方法验证，能够特异性地与小鼠IgM分子的重链（u链）结合，而不与小鼠IgG或小鼠免疫球蛋白的轻链发生反应。这种对重链的专一性识别，确保了在含有混合免疫球蛋白的复杂样本（如血清）中，能够准确无误地检测出IgM，而不会受到IgG的干扰。验证同时表明，未检测到其对非免疫球蛋白血清蛋白的反应性，保证了低背景和高信噪比。但需注意，该抗体可能与其他物种的IgM发生交叉反应，在涉及多物种样本的实验设计中应予以考虑。

抗体格式与结构：本品为全IgG形式。抗体分子通过免疫亲和层析技术从抗血清中分离，保持了完整的天然结构：包含一个Fc片段和两个通过二硫键连接的抗原结合Fab片段，因此具有二价结合能力，亲和力更高。其分子量约为160kDa。全IgG抗体形式适用于绝大多数免疫检测流程（如ELISA、WesternBlot、免疫沉淀等），并且在成本效益方面颇具优势。

克隆性与纯化：属于多克隆抗体，能够识别IgMu链的多个表位，通常可提供更强的信号和更高的检测灵敏度。产品通过将小鼠IgMu链抗原偶联至琼脂糖珠上进行免疫亲和层析纯化，从而获得了J高的纯度，有效去除了非特异性抗体和杂蛋白。

标记状态：本品为未偶联形式。这为用户提供了J大的灵活性，可以根据实验需求，自行选择与不同的报告分子（如酶HRP、AP，荧光染料Cy3、FITC等）进行偶联，或者直接用于需要间接检测法（使用标记的二抗）的实验方案中。

二、使用、储存与稳定性指南

物理状态与储存：与常见的冻干粉形式不同，本品以无菌过滤液体形式提供。应在2-8°C条件下无菌储存，避免冷冻。

工作液制备：抗体工作稀释液建议在使用当天新鲜配制。

有效期：自收货之日起，产品有效期为一年。若经性能测试验证，其活性仍满足实验要求，有效期可酌情延长。

缓冲体系与防腐剂：抗体溶解于pH7.6的0.01M磷酸钠和0.25MNaCl缓冲液中。值得注意的是，产品未添加任何防腐剂（如叠氮钠），这使得它非常适用于细胞培养相关实验或体内注射研究，而无需担心防腐剂的细胞毒性或干扰作用。其无菌过滤的处理也进一步支持了此类应用。

工作浓度建议：对于大多数应用，推荐的工作浓度为10-20ug/ml。与稀释倍数范围不同，直接提供浓度范围更具科学性，因为它排除了原液浓度差异的影响。同样，最佳工作浓度受抗原密度、检测系统灵敏度等多种因素影响，强烈建议通过预实验进行经验性优化。

三、应用实例：在前沿研究中的价值体现

产品说明中引用的文献数据（关于半乳糖凝集素-9，Galectin-9）生动地展示了该抗体的实际应用价值：

在一项旨在鉴定Galectin-9相互作用蛋白的研究中，研究人员使用了FLAG标记的重组Galectin-9(rGal9)与磁珠偶联进行Pull-down实验。

1.免疫印迹验证：通过使用lactose将结合的配体洗脱后，研究者利用这款u链特异性的山羊抗小鼠IgM抗体进行免疫印迹分析。结果清晰地显示，只有在有rGal9存在的条件下，才能特异地检测到小鼠IgM被Pull-down，而对照组则没有信号。这直接证明了Galectin-9能够与IgM结合。

2.Far-Western分析：在另一项实验中，研究人员将不同细胞系（包括原代小鼠B细胞、A20B细胞等）的裂解物进行电泳并转膜，然后直接用FLAG标记的rGal9作为探针进行Far-Westernblot分析。随后，再次使用该抗体对同一张膜进行检测，作为参照，确认了IgM的存在位置，并验证了rGal9与膜上IgM的直接结合。

这些实验数据有力地证明了本品在复杂生物学相互作用研究中的高特异性和可靠性。它不仅能够用于常规的免疫检测，更能胜任像Pull-down、Far-Western这样的前沿技术，是探索IgM相关生物学功能的得力工具。

四、WB实验文献参考：

Galectin-9 binds IgM-BCR to regulate B cellsignaling.

In Nat Commun on 17 August 2018 by Cao,A.,Alluqmani,N.,et al.

Galectin-9 与 IgM-BCR 和 CD45 的结合

a Pull-down 实验示意图：使用与磁珠偶联的 FLAG 标签重组 Galectin-9（rGal9）进行实验。与 Galectin-9 相互作用的配体通过乳糖处理被洗脱，随后通过质谱法进行鉴定。

b 将包被了 rGal9（+rGal9）或未包被 rGal9（-rGal9）的磁珠上经乳糖洗脱的蛋白质，或在存在（+lac）或不存在（-lac）乳糖的条件下，进行 SDS-PAGE，随后使用 CD45 和 IgM 特异性抗体进行免疫印迹分析。

c 对来自原代小鼠 B 细胞（泳道 1）、表达 Hel 特异性 IgM 的 A20 B 细胞（D1.3；泳道 2）、A20 B 细胞（泳道 3）和 Jurkat T 细胞（泳道 4）的细胞裂解液进行裂解，并使用 FLAG 标签的 rGal9 进行 Far-western 分析。右侧显示了针对 CD45 和 IgM 的参考印迹结果。所示数据代表三次独立实验。

五、热门产品

艾美捷科技是Jackson的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。