ALPCO 大鼠α1酸性糖蛋白ELISA，助力生物医学研究

急性期蛋白是感染、炎症或创伤后血浆中浓度增加的蛋白。第一个被认识的急性期蛋白是在1930年由Tillet和Frances在人类中发现的。α1-酸性糖蛋白（AGP）是人和小鼠体内主要的急性期反应物。在急性炎症期间，如类风湿性关节炎、细菌感染等，其在血浆中的浓度会升高，并且可用于检测炎症状况。

α1-酸性糖蛋白检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫吸附测定（ELISA），用于测量大鼠生物样本中的α1-酸性糖蛋白。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品大鼠α1酸性糖蛋白ELISA。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

大鼠α1酸性糖蛋白ELISA检测原理：

双抗体夹心酶联免疫吸附测定的原理在图1中表示。在这种测定中，样品中的α1-酸性糖蛋白与已吸附到聚苯乙烯微孔板表面的抗α1-酸性糖蛋白抗体发生反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）结合的抗AGP抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的AGP形成复合物。经过另一次洗涤步骤后，通过添加显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）来测定免疫吸附剂上结合的酶。结合的酶量与测试样品中AGP的浓度直接相关；因此，450纳米处的吸光度是测试样品中AGP浓度的量度。测试样品中AGP的量可以从标准品构建的标准曲线中插值得到，并根据样品稀释进行校正。

试剂（足够96次测定的数量）

1. 稀释液浓缩液（测定缓冲液）

一瓶含有50毫升5倍浓缩的稀释测定缓冲液。

2. 洗涤液浓缩液

一瓶含有50毫升20倍浓缩的洗涤液。

3. 酶-抗体结合物100倍

一瓶含有150微升亲和纯化的抗大鼠α1-酸性糖蛋白抗体，与辣根过氧化物酶结合，并在稳定缓冲液中。

4. 显色底物溶液

一瓶含有12毫升3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）和过氧化氢，在柠檬酸缓冲液中，pH值为3.3。

5. 终止液

一瓶含有12毫升0.3M硫酸。

警告：避免与皮肤接触。

6. 抗大鼠α1-酸性糖蛋白ELISA微孔板

十二个可移动的八（8）孔微孔条，在孔架中。每个孔都涂有亲和纯化的抗大鼠AGP。

7. 大鼠α1-酸性糖蛋白校准品

一瓶含有冻干的大鼠α1-酸性糖蛋白校准品。

仅限研究使用

试剂准备

1. 稀释液浓缩液

提供的稀释液是5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1份缓冲液浓缩液，4份dH2O）稀释1:5。

2. 洗涤液浓缩液

提供的洗涤液是20倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1份缓冲液浓缩液，19份dH2O）稀释1:20。当储存温度较低时，浓缩液中出现晶体并不罕见。在稀释前将浓缩液加热至30-35°C可以溶解晶体。

3. 酶-抗体结合物

通过向每个微孔板测试条添加10微升酶-抗体结合物至990微升1倍稀释液中，计算每个微孔板测试条所需的工作结合物溶液量。均匀但轻柔地混合。避免起泡。

4. 显色底物溶液

按供应状态直接使用。

5. 终止液

按供应状态直接使用。

6. 抗大鼠α1-酸性糖蛋白ELISA微孔板

按供应状态直接使用。揭开微孔板袋封口，从袋中取出板。取出在测定中不会使用的所有条和孔，放回袋中并重新密封，并与干燥剂一起存放。

7. 大鼠α1-酸性糖蛋白校准品

向大鼠α1-酸性糖蛋白校准品中加入1.0毫升蒸馏或去离子水，轻轻混合直至溶解。校准品现在的浓度为2.38微克/毫升（如果打算将来使用，应分装并冷冻重悬的校准品）。大鼠α1-酸性糖蛋白标准品需要在立即使用前准备（见下表）。每步之间充分混合。避免起泡。

程序的局限性

1. 当完全理解了说明书中的信息，并遵循良好的实验室操作规范时，将获得可靠和可重复的结果。

2. 可能影响测定性能的因素包括仪器的正确功能、玻璃器皿的清洁度、蒸馏水或去离子水的质量以及试剂和样品移液的准确性、洗涤技术、孵育时间或温度。

3. 不要将试剂与其他批次或来源的试剂混合或替换。

附录A - 参考血清信息

本试剂盒中包含一瓶参考血清。

请参阅随附的产品概况表以获取特定批次的信息。

请注意以下事项：

1参考血清在有效期前是稳定的。

2参考血清应适当稀释，以适应标准曲线范围。有关说明，请参考协议中的“样品稀释”部分。

3在移液样品（程序部分）的同时，也应以双份移液参考血清。

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。