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IVD原料之二抗篇:辣根过氧化物酶HRP标记亲和纯化山羊抗兔IgG(H+L)二抗

发布者:艾美捷科技    发布时间:2022-08-29     
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抗体对于科学研究,诊断学和治疗学来说是非常有价值的。这些简单而强大的科学工具已进入多个领域和应用程序。一抗特异性结合目标蛋白(抗原)。识别一抗的带标记二抗为检测提供信号。多个多克隆二抗可与每个一抗结合,与直接标记的一抗相比,可提供信号放大的作用。   


由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以应用广泛,如ELISA、化学发光(以标记了酶的抗体或抗原为标记来检测特异性的蛋白质),免疫组织化学(检测组织中的特异性抗原),免疫细胞化学(检测细胞的抗原组成),流式细胞术(通过检测激光所激发荧光来鉴定分离不同类型的细胞)等。   


二抗是体外诊断试剂开发和生产过程中的重要原料之一,合理、灵活地选择和使用二抗有助于节约产品研发周期、提高产品灵敏度。  


什么是二抗?

二抗是识别来自不同物种的抗体(或抗体结构域)的抗体。在许多不同的实验方案中,二抗用于结合一抗(对目标蛋白(抗原)具有特异性)。结合的二抗(标记有报告分子,如酶或荧光团)可用于显现抗原。未偶联的二抗也有许多应用,例如,包被ELISA板或beads以捕获或纯化一抗。  


二抗

A:直接免疫组织化学(IHC),直接标记的一抗与目标蛋白(抗原)特异性结合; B:间接IHC,多个标记的二抗结合至每个一抗,放大信号; C:通过使用生物素化的二抗,然后结合偶联的链霉亲和素,可以实现进一步的信号放大。  


为什么要使用二抗?

与直接方法相比,使用二抗的间接方法具有许多优势。

1.固有信号增强——多个二抗结合到一个抗原结合的一抗上,将额外的报告分子带入抗原-抗体复合物(上图B)。加入生物素化的二抗,然后结合链霉亲和素,可进一步增强信号(上图C)。

2.扩展的偶联物的选择——一抗通常偶联于有限范围的报告分子(或仅提供未偶联的一抗)。二抗扩展了许多不同探针的使用,增加了试验设计的灵活性,包括多种标记方案。

3.防止对抗体结合部位的干扰——一抗的抗原结合位点(paratope)可能由于偶联到了报告分子而受损,从而降低其结合目标蛋白的能力。使用偶联标记的多克隆二抗产生信号可以保留一抗的活性。


 小艾重推热销二抗:111-035-003

为了助力广大科研工作者对生物医学的探索和开发,艾美捷科技作为专业的生命科学领域解决方案供应商,为您推荐Jackson ImmunoResearch品牌热销爆款二抗:辣根过氧化物酶HRP标记亲和纯化山羊抗兔IgG(H+L)二抗,货号为111-035-003。  


111-035-003


 111-035-003是通过免疫亲和层析从抗血清中分离出完整的IgG抗体分子。它们具有一个Fc部分和通过二硫键连接在一起的两个抗原结合Fab部分,因此它们是二价的。据报道,其平均分子量为约160 kDa。抗体的完整IgG形式适用于大多数免疫检测程序,并且是最经济有效的。

111-035-003经免疫电泳和/或ELISA检测,该抗体与全分子兔IgG发生反应。它也与其他兔免疫球蛋白的轻链反应。未检测到针对非免疫球蛋白血清蛋白的抗体。该抗体可能与来自其他物种的免疫球蛋白发生交叉反应。  


111-035-003产品信息一览表:

111-035-003产品信息一览表
英文名称Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)
中文名称辣根过氧化物酶HRP标记亲和纯化山羊抗兔IgG(H+L)二抗
靶标兔子
宿主山羊
抗体形式全IgG
特异性IgG(H + L)
偶联标记物辣根过氧化物酶(HRP)
产品类别完整IgG亲和纯化的抗体
克隆性多克隆
产品状态冻干粉(具体以所购批次的说明书为准)
保存和溶解原装冻干粉储存在2-8°C。用产品说明书指定体积的dH2O复水,如果不清晰,则离心。在使用当天准备工作稀释液。未稀释液体产品在2-8°C下可稳定保存6周。(具体以所购批次的说明书为准)
溶解后保存方法方法一:分装并冷冻于-70°C或更低的温度,避免反复冻融。方法二:添加等体积的甘油(ACS级或更高),使最终浓度减半,并以液体形式存储于-20°C。 有效期为自溶解日起一年。如果测试结果对预期用途是可接受的,有效期可以延长。
纯化方法使用与琼脂糖珠偶联的抗原通过免疫亲和色谱法从抗血清中纯化抗体。
缓冲液成分0.01M磷酸钠,0.25M NaCl,pH 7.6(具体以所购批次的说明书为准)
稳定剂15 mg/ml牛血清白蛋白(不含IgG,不含蛋白酶)(具体以所购批次的说明书为准)
防腐剂无(注意:使用叠氮化钠作为防腐剂将抑制辣根过氧化物酶的酶活性)
建议的工作浓度或稀释范围1:500 - 1:5000用于免疫组化/免疫细胞化学 1:5000 - 1:100000用于显色法的ELISA和WB(显色底物) 1:10000 - 1:200000用于使用ECL底物的WB

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