Alexa Fluor 647 AffiniPure Fab片段山羊抗人IgG，冻干复水、预复合操作与共聚焦仪器匹配

一、产品定位与基本信息

由艾美捷代理Jackson推出的Alexa Fluor 647 AffiniPure Fab 片段山羊抗人 IgG（Fcγ 段特异性）货号 109-607-008，RRID 为 AB_2632454，以山羊为宿主、靶向人 IgG 的 Fcγ 段，抗体形式为 Fab 片段，偶联 Alexa Fluor? 647 远红外荧光染料，属于 FabuLight 亲和纯化 Fc 特异性 Fab 片段系列，为多克隆抗体。产品以冻干固体形式供应，将 Fab 片段的单价、小分子特性与 Alexa Fluor 647 的远红外优势结合，适用于需要避免二抗交联一抗、降低空间位阻或进行远红外多色检测的实验场景。

二、特异性与交叉反应

经免疫电泳和/或 ELISA 验证，该抗体与人 IgG 重链 Fc 段反应，但不与人 IgG 的 Fab 段反应；未检出针对人 IgM、IgA 或非免疫球蛋白血清蛋白的抗体。产品可能与其他物种的免疫球蛋白发生交叉反应，跨物种样本使用时应通过预实验评估背景。

三、Fab 片段的形式优势

Fab 片段由木瓜蛋白酶消化完整 IgG 制备，去除包括铰链区在内的整个 Fc 部分，仅含单个抗原结合位点，为单价抗体，分子量约 50 kDa。由于单价且分子小，Fab 片段可避免二抗交联一抗造成的信号聚集或抗原遮蔽，适合顺序标记、组织渗透要求高的样本以及需要精确计量标记的实验。产品经木瓜蛋白酶消化与免疫亲和层析联合纯化，已去除 Fc 片段和完整 IgG 分子。

四、储存、复水与缓冲体系

冻干固体应于 2–8°C 储存；复水时按规格说明加入指定体积去离子水，若溶液不澄清可离心处理，工作稀释液须当日配制。未稀释液体在 2–8°C 下约可稳定保存 6 周；若需延长保存，复水后可分装并于 -70°C 或更低温度冻存，避免反复冻融，也可加入等体积甘油至终浓度 50% 后于 -20°C 保存。复水后有效期一般为一年，若实测结果满足使用要求可适当延长。缓冲体系为 0.01M 磷酸钠、0.25M NaCl，pH 7.6，含 15 mg/ml 无 IgG、无蛋白酶牛血清白蛋白作为稳定剂，防腐剂为 0.05% 叠氮化钠，使用时应按实验室规范处理含叠氮化钠废液。

五、工作浓度与预复合操作

顺序标记应用中推荐稀释范围为 1:100–1:800。若需与一抗在溶液中预复合，按 Fab:一抗 = 1:1 重量比（约 3:1 摩尔比）混合，涡旋后室温孵育 30 分钟再使用，并将复合物滴定至实验最佳稀释度。最佳稀释度受抗原密度、通透性等因素影响，实际浓度须经实验经验确定。

六、荧光偶联物特性与仪器匹配

Alexa Fluor 647 最大吸收波长约 651 nm，最大发射波长约 667 nm，在水性封片介质中亮度高于 Cy5 和 DyLight 650。该波长区域生物样本自发荧光低，是多色标记共聚焦检测的优选远红染料；在流式细胞术中，Alexa Fluor 647 与 APC 偶联二抗是理想选择，且成本低于 APC 偶联物。但因其发射峰在 667 nm，肉眼观察效果差，也无法被汞灯有效激发，因此不推荐用于常规落射荧光显微镜，应使用配备相应激光器和远红外检测器的共聚焦显微镜进行观察。

七、文献参考

Drug-controlled CAR T cells through the regulation of cell-cell interactions.

In Nature Chemical Biology on 1 October 2026 by Scheller, L., Giordano Attianese, G. M. P., et al.

Engineered ipilimumab variants that bind human and mouse CTLA-4.

In MAbs on 1 December 2025 by Robison, B., Diong, S. J., et al.

Improving dual targeting selectivity in T-cell engagers via synapse-gated and affinity-tuned trispecific antibody design.

In MAbs on 1 December 2025 by Zhao, P., Schardt, J., et al.