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Peroxidase AffiniPure 山羊抗鸡 IgY(IgG)(H+L):高特异性HRP标记二抗的选型要点

发布者:艾美捷科技    发布时间:2026-11-11     
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一、产品基本信息

由艾美捷代理Jackson推出的Peroxidase AffiniPure 山羊抗鸡 IgY(IgG)(H+L)是一款经亲和层析纯化的多克隆二抗,货号 103-035-155,RRID 为 AB_2337381。该产品以山羊为宿主,靶向鸡源抗体,抗体形式为完整 IgG,偶联辣根过氧化物酶(HRP),属于全 IgG 亲和纯化抗体类别。产品以冻干固体形式供应,适用于以鸡源一抗为检测对象的多种免疫检测实验,兼具高特异性与成本效益,是免疫组化、Western blot 和 ELISA 等常规实验的实用选择。

 

二、特异性与交叉反应控制

该抗体可识别鸡 IgY 全分子,并与鸡其他免疫球蛋白的轻链发生反应。经免疫电泳和/或 ELISA 验证,产品对非免疫球蛋白血清蛋白无检出反应。为降低交叉反应风险,抗体经 ELISA 测试和/或固相吸附处理,确保与牛、山羊、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、小鼠、兔、大鼠和绵羊血清蛋白的交叉反应最小化。但需注意,其仍可能与其他物种的免疫球蛋白发生交叉反应,因此在跨物种样本中使用时应结合预实验评估背景信号,以确认适用性。

 

三、抗体形式与制备工艺

该产品为完整 IgG 抗体,通过免疫亲和层析从抗血清中分离获得,保留 Fc 段及两个抗原结合 Fab 段,经二硫键连接形成二价结构,平均分子量约 160 kDa。完整 IgG 形式适用于大多数免疫检测流程,且在生产成本上更具优势,适合需要经济高效二抗的常规实验场景。纯化过程采用偶联琼脂糖珠的抗原进行免疫亲和层析,保障产品纯度。

 

四、储存、复水与稳定性管理

产品以冻干固体形式供应,应于 2–8°C 储存。复水时按产品规格说明加入指定体积的去离子水,若溶液不澄清可离心处理。工作稀释液须当日配制;未稀释液体在 2–8°C 下约可稳定保存 6 周。若需延长保存,复水后可分装并于 -70°C 或更低温度冻存,避免反复冻融;也可加入等体积甘油(ACS 级或更优)至终浓度 50%,以液体形式于 -20°C 保存。复水后有效期一般为一年,若实测结果满足使用要求,可适当延长。

 

五、缓冲体系与防腐注意事项

产品缓冲体系为 0.01M 磷酸钠、0.25M NaCl,pH 7.6,含 15 mg/ml 无 IgG、无蛋白酶牛血清白蛋白作为稳定剂,不含防腐剂。需特别警告:使用叠氮化钠作为防腐剂会显著抑制辣根过氧化物酶的酶活性,因此在保存和使用过程中应避免引入叠氮化钠,以免影响检测灵敏度。

 

六、工作浓度与稀释范围建议

推荐稀释范围因实验类型而异:免疫组化/免疫细胞化学为 1:500–1:5,000;采用显色底物的 ELISA 和 Western blot 为 1:5,000–1:100,000;采用 ECL 底物的 Western blot 为 1:10,000–1:200,000。稀释倍数以范围形式给出,因为最佳稀释度受抗原密度、通透性等多种因素影响,实际使用浓度须经实验经验确定。

 

七、偶联物特性与检测优势

HRP 偶联物采用改良的 Nakane 和 Kawaoi 方法(J. Histochem. Cytochem. 1974. 22, 1084)制备。过氧化物酶偶联物广泛用于免疫组化、Western blot 和 ELISA。在哺乳动物细胞免疫染色中,使用抗辣根过氧化物酶可降低背景,因为该抗体不识别这些细胞中内源性过氧化物酶样酶,从而提升信噪比,适合对背景要求较高的检测实验。


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