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BPS Bioscience:多聚ADP核糖水解酶(PARG)荧光检测试剂盒

发布者:艾美捷科技    发布时间:2023-11-28     
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作为DNA损伤应答的首要应答因子,PARP1和PARP2(多聚ADP核糖聚合酶,Poly ADP-ribose polymerases,PARPs)能够感知DNA中的单链断裂,并结合到受损区域,然后在自身蛋白骨架、组蛋白和其他修复蛋白上添加多聚腺苷二磷酸核糖(poly-ADP ribose,PAR)链,以招募和激活它们。PAR化的PARP随后与DNA分离,使其他蛋白质能够启动修复过程。通过蛋白质PARG(多聚ADP核糖水解酶,Poly ADP-riboseglycohydrolase)去除PAR链,将PARP恢复到其非活性形式,准备再次感知DNA损伤。因此,PARG在DNA修复过程中发挥着关键作用,包括碱基切除修复和单链断裂修复,通过从PARP修饰的蛋白质中去除PAR链,实现DNA修复和这些关键蛋白质的再利用。PARG活性的失调已被认为与各种疾病,包括癌症有关。针对PARG进行治疗作为一种潜在的策略,已经越来越受到关注,可以增加癌细胞对诱导DNA损伤的药物的敏感性。抑制PARG活性会增加蛋白质上的PAR积累,并干扰DNA修复机制,最终导致细胞死亡。因此,开发PARG抑制剂作为治疗药物已成为癌症治疗的有前景的方法,特别是与放疗和化疗等诱导DNA损伤的药物联合使用。  

PARPs.png


  PARG荧光酶活性测定试剂盒采用简单直观的荧光测定方法,旨在检测多聚ADP核糖水解酶(PARG)的水解酶活性,用于筛选和分析应用。PARG荧光酶活性测定试剂盒包含足够的纯化重组PARG酶、底物和测定缓冲液,还包含PARG抑制剂PDD00017273作为PARG活性的对照。  


PDD00017273.png


货号78858-1(96 次)78858-2(384次)
名称PARG Fluorogenic Assay Kit 多聚ADP核糖水解酶(PARG)荧光检测试剂盒
检测原理PARG与含有荧光基团的ADP核糖底物共孵育,其中荧光团因核糖的存在淬灭。在PARG作用下,荧光基团被释放出来,在λ=502 nm处可检测到荧光(激发波长为λ=385 nm)。因此荧光强度与PARG水解酶活性成正比。
应用研究酶动力学并筛选小分子抑制剂,用于药物发现和高通量筛选(HTS)应用
结果图

PARG.png

PARG的梯度活性:在5uM荧光性PARG底物中增加酶的孵育量

PDD0001727-1.png

抑制剂对PARG活性的抑制作用:在PARG抑制剂PDD00017273浓度增加的情况下,测检测PARG活性

  

PARG的活性及抑制剂筛选检测都依赖于酶活性蛋白的质量。这些检测方法都会使用在Sf9细胞中产生并亲和纯化的112 kDa全长His-标记的PARG重组蛋白。蛋白质浓度使用Bradford/BCA分析确定。每个新批次的蛋白质都通过荧光测定确认其活性。

货号101726
名称PARG, His-Tag Recombinant 多聚ADP核糖水解酶(PARG)重组蛋白,His标签
序列His-2-976(end)
纯度≥70%
表达系统Sf9
应用对于酶动力学研究、筛选抑制剂和选择性分析非常有用
SDS-PAGE

101726.png

活性

PARG, His-Tag Recombinant.png

 

PARG作为参与PAR链降解的分解酶,释放出ADP-核糖和寡聚(ADP-核糖)链。PAR的稳态平衡受到PAR聚合酶家族(PARPs)和PARG的调节,以应对细胞应激条件,如DNA损伤应答(DDR)。PARG的活性与炎症、缺血、中风和癌症等细胞反应相关。PARG在乳腺癌中过度表达,并与肿瘤生长和存活相关。降低PARG活性可以增强当前癌症治疗(如化疗和放疗)的效果,因此使用选择性抑制剂抑制PARG成为癌症和免疫疗法中有前景的方法。更多PARG相关产品详询艾美捷科技!   


BPS bioscience总部坐落于世界最大之一的美国圣地亚哥生命科学研究机构和公司集中地的中心。公司主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶。BPS公司为药物研发用重组酶类的提供了最大选择之一。  


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