蛋白质泛素化是一种复杂而精密的翻译后修饰,它调控着从蛋白质降解、DNA修复到免疫应答、细胞周期进程等几乎所有的细胞生命活动。泛素化异常与癌症、神经退行性疾病、炎症等多种人类重大疾病密切相关,因此,准确捕获和检测泛素化蛋白对于基础研究和药物开发至关重要。然而,传统的研究方法往往受限于低丰度泛素化蛋白的难捕获、多步骤繁琐操作以及检测灵敏度不足等挑战,难以满足现代科研对高通量、高内涵分析的需求。
2026年,LifeSensors公司推出了开创性的Alexa TUBEs系列产品,将高亲和力的串联泛素结合实体(TUBEs)技术与Alexa Fluor明亮荧光染料相结合,实现了对多聚泛素化蛋白的直接、灵敏、快速检测。Alexa TUBEs的问世,为泛素化研究带来了革命性的变革——它不仅简化了实验流程,更拓展了从分子互作到细胞成像、再到药物筛选的多维度应用场景。
TUBEs技术:千倍亲和力,稳定捕获低丰度靶标
TUBEs(Tandem Ubiquitin Binding Entities)是基于天然泛素结合域(UBAs)设计的人工串联蛋白。通过将多个泛素结合域首尾相连,TUBEs对多聚泛素链产生了极强的多价结合效应。与单个UBA相比,TUBEs对多聚泛素链的亲和力提高了1000倍以上,使其能够在复杂的生物样本中高效富集多聚泛素化蛋白,即使是极低丰度的修饰蛋白也能被灵敏地“捕获”。
更重要的是,TUBEs结合后会对多聚泛素链产生空间位阻保护作用,有效屏蔽去泛素化酶(DUBs)和蛋白酶体的降解或去修饰活性。这种保护效应不仅稳定了泛素化蛋白的天然状态,还确保了后续检测结果的准确性和可靠性,避免了因样品处理过程中泛素链被破坏而导致的假阴性结果。
Alexa荧光标记:高亮度、高稳定性,直接读出具
在TUBEs技术的基础上,LifeSensors创新性地将Alexa Fluor 647染料标记在TUBEs融合标签的特定位点。Alexa 647是业内公认的优异荧光染料,具有以下突出优势:
·极高的荧光量子产率和光稳定性:在激光照射下不易光漂白,适合长时间成像和定量分析。
·激发/发射峰位于650/665 nm:处于远红光谱区,可有效避开细胞自发荧光背景,信噪比极高。
·pH值不敏感(pH 4–10):在各种实验缓冲液中均能保持稳定荧光强度。
关键的是,LifeSensors通过定点标记技术,确保了荧光基团的连接不影响TUBEs对多聚泛素链的结合活性。因此,Alexa-TUBEs既是高效的亲和工具,又是明亮的荧光探针,实现“一物两用”——无需二抗或其他放大步骤,即可直接检测和可视化多聚泛素化蛋白。
多款产品满足不同泛素链特异性需求
泛素链的连接类型(如K48、K63等)决定了被修饰蛋白的不同命运:K48连接主要介导蛋白酶体降解,而K63连接参与信号转导、DNA修复等过程。为了满足研究者对泛素链类型特异性分析的需求,Alexa TUBEs系列提供了针对不同泛素链的选择:
产品编号 | 名称 | 规格 | 特点 |
UM-0701A-0025 | TUBE 1 (Alexa 647) | 25 ug | 广谱识别多种多聚泛素链,适用于泛素化蛋白的整体富集和检测 |
UM-0702A-0025 | TUBE 2 (Alexa 647) | 25 ug | 与TUBE1互补的泛素结合谱,扩大捕获范围 |
UM-0704A-0025 | K63 TUBE (Alexa 647) | 25 ug | 特异性结合K63连接的多聚泛素链,用于自噬、信号转导等研究 |
UM-0707A-0025 | K48 TUBE HF (Alexa 647) | 25 ug | 高亲和力特异性结合K48连接的多聚泛素链,用于蛋白酶体降解途径研究 |

从分子互作到活细胞成像:全方位的应用解决方案
Alexa TUBEs凭借其直接荧光读出的特性,可无缝整合到多种实验平台中:
1. 多聚泛素化蛋白的富集与Western Blot检测
将Alexa-TUBEs与细胞裂解液孵育,即可高效捕获泛素化蛋白。捕获后的复合物可直接进行SDS-PAGE电泳,由于TUBEs自带荧光,可在凝胶或膜上直接扫描荧光信号,省去了传统Western Blot中繁琐的抗体孵育步骤,大幅缩短实验周期。
2. 荧光显微镜成像与亚细胞定位
Alexa-TUBEs可直接用于免疫荧光染色,标记细胞内源性的多聚泛素化蛋白。结合共聚焦显微镜,研究者可以观察泛素化信号在细胞核、胞浆、聚集物等亚细胞结构的分布和动态变化。例如,在神经退行性疾病模型中,可追踪异常蛋白聚集体中的泛素化修饰。
3. 高通量药物筛选
在去泛素化酶(DUBs)或E3连接酶的抑制剂筛选中,Alexa-TUBEs可作为荧光探针应用于荧光偏振(FP)、时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)等均相检测模式。其高灵敏度和稳定性保证了筛选结果的可靠性和可重复性,适用于384孔甚至1536孔板的高通量筛选。
4. 蛋白质互作研究
利用Alexa-TUBEs的荧光特性,可与pull-down技术结合,研究特定刺激下蛋白质泛素化状态的改变及其与下游效应分子的相互作用。号的动态变化和空间分布。
产品优势总结
·直接荧光读出具:无需二抗,简化操作,减少误差。
·超高亲和力:比单个UBA高1000倍,有效捕获低丰度靶标。
·泛素链保护作用:防止去泛素化和降解,保留样品真实性。
·类型特异性可选:广谱、K63特异性、K48特异性产品满足不同研究需求。
·高光稳定性:Alexa染料确保成像和定量的准确性。
·快速工作流程:从样品处理到数据获取可在数小时内完成。
LifeSensors的Alexa TUBEs产品系列的推出,标志着泛素化研究进入了直接荧光检测的新时代。它简化了繁琐的实验步骤,提升了检测灵敏度和特异性,同时拓展了研究的广度和深度。无论是基础科研人员,还是药物研发科学家,都能从这一创新工具中获益。
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