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SySy-标记循环突触小泡相关产品

发布者:艾美捷科技    发布时间:2021-10-22     
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在上一篇文章中,小艾介绍了神经信号如何在神经元中进行传递的:https://www.amyjet.com/featured/synapse-2.shtml

神经元通过突触相互交流,其中电化学信号转化为生化信号。信息通过释放神经递质进入突触间隙传递,并在突触后侧被相应的受体蛋白接收【1】。在此过程中,突触囊泡与突触前膜融合,使内囊泡膜暂时暴露于细胞外空间。

 synaptic-proteins.png

在培养的海马神经元中,管腔蛋白表位因此可以被添加到培养基中的抗体结合,然后在随后的网格蛋白介导的内吞作用中掺入突触小泡【2】。内吞作用后,突触小泡的内腔被质子 ATP 酶重新酸化。由此产生的质子梯度需要用由特定囊泡神经递质转运蛋白介导的神经递质分子重新加载突触囊泡,为下一轮融合做好准备 【3】。

通过这种方法,可以选择性标记具有持续囊泡循环的活跃突触(图1)。例如,如果应用针对 Synaptotagmin1 的抗体,则所有活跃的突触都会独立于其神经递质表型进行标记(图2)。相比之下,针对囊泡 GABA 转运蛋白 (VGAT) 的抗体允许选择性标记专门激活的抑制性突触【4】。pH 敏感荧光染料,例如CypHer5E和AcidiFluor Orange,仅在酸性环境中才会发荧光。因此,相应的抗体偶联物非常适合检测活细胞中的再循环突触囊泡,因为它们仅在抗体完全内化和突触囊泡腔重新酸化后才会亮起(图2)。

 Synaptotagmin1.jpeg

图1:用针对突触囊泡蛋白管腔表位的荧光染色抗体标记回收突触囊泡。

 sysy-105311AF.jpeg

图2:在培养的海马神经元中标记回收囊泡(货号105 311AF)。活细胞与培养基中的标记抗体一起温育30分钟。

 

当使用一级标记抗体时,无需额外固定、透化或应用任何二级试剂,即可直接观察回收囊泡。或者,可以将一抗与NanoTags 二级 FluoTag预孵育以形成一二抗体复合物。然后,这些复合物可以像初级标记抗体一样用于直接标记活神经元。

Synaptic Systems 提供针对突触囊泡蛋白管腔表位的独特抗体组合,适用于回收囊泡的活性依赖性标记。一组不同的荧光团偶联物可满足您的确切需求。

 

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Synaptotagmin1(多克隆)

 

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Synaptotagmin1(单克隆)

 

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Synaptotagmin2(多克隆)

 

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VGAT(多克隆)

 

货号名称规格应用类型
131 103VGAT, rabbit, polyclonal, affinity purified K.O. luminal domain50 ?gWB IP ICC IHC
131 103AFVGAT, rabbit, polyclonal, affinity purified, AcidiFluor Orange luminal domain50 ?gICC

 

参考文献

 

【1】Sudhof,2004 年:突触小泡循环。

【2】Kraszewski 等人,1995 年:活体培养海马神经元中的突触小泡动力学,用针对突触结合蛋白管腔结构域的 CY3 偶联抗体进行可视化。

【3】Gasnier,2000:将神经递质加载到突触小泡中。

【4】Martens 等人,2008 年:VGAT-C 末端的独特管腔定位允许选择性标记活动的皮质 GABA 能突触。

 

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