AAT Bioquest：ReadiLink/ReadiLink xtra/Buccutite快速抗体标记试剂盒

发布者：艾美捷科技发布时间：2025-03-31

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在生物科学和医学研究领域，抗体标记已成为一项重要且常规的操作。标记物的种类繁多，从荧光染料等视觉标记到生物素等半抗原分子，可用于增强免疫复合物和蛋白-蛋白相互作用的可见性，或用于蛋白质的分离与纯化。选择哪种标记物，取决于抗体的下游应用。荧光标记主要用于细胞成像、流式细胞术、荧光印迹和免疫荧光应用；酶标记（如辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）常用于印迹、ELISA和免疫组化应用；生物素等半抗原标记则是一种更灵活的标记选项，可用于蛋白质分离、纯化以及上述所有应用。

AAT Bioquest提供了一系列全面的抗体和蛋白标记试剂盒，这些试剂盒专为新手科学家设计，操作简单，无需太多实践经验。

抗体标记试剂盒概览:

表1. 抗体标记试剂盒对比:

项目	ReadiLink试剂盒	ReadiLink xtra试剂盒	Buccutite试剂盒
每次反应标记的抗体量	50 ug	50 ug	25 ug、50 ug或1 mg
标记化学	通过胺反应性染料靶向自由胺基	通过胺反应性染料靶向自由胺基	使用两个专有连接子促进蛋白-蛋白偶联
可用标记物	iFluor染料、mFluor染料、Alexa Fluor等效AF染料、FITC、Cy3、Cy5、Cy7、生物素	iFluor染料、Alexa Fluor等效AF染料、FITC、Cy3、Cy5、Cy7	PE、APC、串联染料、HRP、AP
标记物与抗体之间的键类型	共价键	共价键	共价键
是否兼容BSA或其他稳定剂	否	是	否
是否需要纯化	否	否	否
偶联所需时间	1小时	1小时	2小时
手动操作时间	约10分钟	约10分钟	约15分钟
批次间差异	最小	最小	最小
应用	成像、流式细胞术、免疫荧光、WB	成像、流式细胞术、免疫荧光、WB	流式细胞术、免疫荧光、免疫组化、WB、ELISA

一．ReadiLink快速抗体标记试剂盒:

AAT Bioquest的ReadiLink快速抗体标记试剂盒为研究人员提供了一种快速便捷的方法，用于将微小体积的抗体与我们的优质iFluor染料、mFluor染料或其他标记物进行标记。ReadiLink试剂盒的独特化学性质使研究人员能够在无需纯化步骤的情况下轻松标记并回收100%的抗体。由于ReadiLink偶联物是共价标记的，因此它们适合长期储存。它们适用于包括荧光显微镜、多色成像、多参数流式细胞术、原位检测、免疫组化、荧光原位杂交、ELISA等在内的多种应用。

ReadiLink快速抗体标记试剂盒的关键特点:

1可标记单克隆抗体、多克隆抗体或其他蛋白

2快速简便的两步标记协议，无需化学或偶联经验

3适用于标记100 ?g抗体（两次单独的50 ?g抗体标记反应）

4100%抗体回收，**无需**对产品进行纯化

5偶联物1小时内即可使用，手动操作时间仅需约10分钟

6可选择iFluor染料、mFluor染料、Alexa Fluor等效XFD染料、FITC、Cy3、Cy5、Cy7、BSA、KLH或生物素;

7避免使用任何含胺缓冲液（如Tris或甘氨酸）

8必须在标记前去除稳定蛋白（如BSA或明胶）；若需使用兼容BSA的抗体标记试剂盒，请选择ReadiLink xtra快速抗体标记试剂盒

ReadiLink xtra.png

ReadiLink抗体标记工作流程

ReadiLink快速抗体标记试剂盒利用胺反应性标记物制备共价标记的偶联物。这些反应性标记物选择性地靶向并结合到抗体上的自由胺基，如赖氨酸残基。要标记您的抗体，将抗体溶液（浓度约为1 mg/mL）与ReadiLink反应缓冲液混合，将混合物加入预配方标记物的小瓶中，并孵育30至60分钟。最后，将TQ-Dyed猝灭缓冲液加入到您的混合物中并充分混合。这一步是关键，因为它消除了背景干扰以及柱纯化步骤。孵育10分钟后，您的偶联物即可使用。

流式细胞术分析人PBMC细胞。使用ReadiLink快速iFluor488抗体标记试剂盒（货号1255）或Lightning-Link快速Alexa Fluor488标记的抗人CD4抗体。使用ACEA NovoCyte流式细胞仪在FITC通道监测荧光信号。

标记试剂盒	CD4（SK3）-偶联物	染色指数
ReadiLink试剂盒	CD4-iFluor488偶联物	43
Lightning-Link试剂盒	CD4-Alexa Fluor488偶联物	26

表2. ReadiLink快速抗体标记试剂盒选择指南

荧光	等效替代	Ex/Em (nm)	成像	流式	货号
mFluor Violet 420	Cascade Blue	398/411	-	Yes	1105
iFluor 350	AMCA, Alexa Fluor 350	345/442	Yes	-	1220
mFluor Violet 450	Pacific Blue	403/454	-	Yes	1100
mFluor Violet 510	-	414/508	-	Yes	1110
iFluor 488	FITC, Alexa Fluor 488	491/514	Yes	Yes	1255
FITC	-	494/520	Yes	Yes	1299
mFluor Violet 540	Pacific Orange	405/537	-	Yes	1114
Cy3	-	555/565	Yes	-	1290
iFluor 555	Cy3, Alexa Fluor 555	552/567	Yes	-	1227
mFluor Blue 570	R-PE	553/570	-	Yes	1120
iFluor 594	Texas Red, Alexa Fluor 594	592/614	Yes	-	1230
mFluor Green 620	-	522/617	-	Yes	1123
iFluor 633	Cy5, Alexa Fluor 633	638/655	Yes	Yes	1260
Cy5	-	644/665	Yes	Yes	1292
iFluor 647	Cy5, Alexa Fluor 647	654/674	Yes	Yes	1235
mFluor Red 700	APC-Alexa Fluor 700 Tandem	657/700		Yes	1130
iFluor 680	Cy5.5, Alexa Fluor 680, IRDye 700	682/701	Yes	Yes	1240
iFluor 700	Alexa Fluor 700	693/713	Yes	Yes	1245
Cy7	-	749/776	Yes	-	1294
iFluor 750	Cy7, Alexa Fluor 750	753/779	Yes	-	1250
mFluor Red 780	APC-Alexa Fluor 750 Tandem	629/780	-	Yes	1131
iFluor 790	IRDye 800, Alexa Fluor 790	782/811	Yes	-	1265

二．兼容BSA的ReadiLink xtra快速抗体标记试剂盒：

ReadiLink xtra快速抗体标记试剂盒具有BSA兼容性，将标记一抗的便利性提升到了一个新的水平。利用优化的标记协议和特别配方的标记物小瓶，ReadiLink xtra试剂盒能够在存在常见缓冲液添加剂和稳定蛋白的情况下，快速且可重复地标记微克量的一抗。只需两个简单的步骤，无需柱纯化，即可共价标记适用于任何基于免疫的应用的抗体。

ReadiLink xtra快速抗体标记试剂盒的关键特点:

1与BSA和其他稳定蛋白兼容

2可标记单克隆抗体、多克隆抗体或其他蛋白

3标记100 ?g抗体（两次单独的50 ?g抗体标记反应）

4100%抗体回收，**无需**对产品进行纯化

5偶联物1小时内即可使用，手动操作时间仅需约10分钟

6可选择iFluor染料、mFluor染料、Alexa Fluor等效XFD染料、FITC、Cy3、Cy5或Cy7

表3. ReadiLink xtra Rapid 抗体标记试剂盒

产品名称	Ex (nm)	Em (nm)	规格	货号
ReadiLink xtra Rapid iFluor 350 Antibody Labeling Kit	344	448	2 Labelings	1950
ReadiLink xtra Rapid iFluor 488 Antibody Labeling Kit	491	516	2 Labelings	1955
ReadiLink xtra Rapid XFD488 Antibody Labeling Kit	499	520	2 Labelings	1978
ReadiLink xtra Rapid FITC Antibody Labeling Kit	491	516	2 Labelings	1970
ReadiLink xtra Rapid iFluor 555 Antibody Labeling Kit	556	569	2 Labelings	1958
ReadiLink xtra Rapid XFD555 Antibody Labeling Kit	553	568	2 Labelings	1980
ReadiLink xtra Rapid iFluor 594 Antibody Labeling Kit	587	603	2 Labelings	1960
ReadiLink xtra Rapid XFD594 Antibody Labeling Kit	590	618	2 Labelings	1982
ReadiLink xtra Rapid iFluor 647 Antibody Labeling Kit	654	669	2 Labelings	1963
ReadiLink xtra Rapid XFD647 Antibody Labeling Kit	650	671	2 Labelings	1985
ReadiLink xtra Rapid iFluor 750 Antibody Labeling Kit	759	777	2 Labelings	1965
ReadiLink xtra Rapid XFD750 Antibody Labeling Kit	752	776	2 Labelings	1988

三．Buccutite蛋白质到蛋白质标记试剂盒:

Buccutite交联技术提供了一种无故障的方法，可以用辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AP）或藻胆蛋白共价标记蛋白质和抗体。与传统的蛋白质-蛋白质偶联技术（如SMCC化学标记法）相比，Buccutite偶联明显更稳健，要求更低。这些试剂盒允许在不到两小时的时间内对微克量的抗体进行最佳标记（每次标记反应仅需25?g），无需纯化，产率为100%。使用Buccutite标记试剂盒，常规制备共价标记的偶联物，这些偶联物能够承受典型免疫测定（如ELISA、IHC和Western blot）或流式细胞术应用中通常需要的严格洗涤技术。

Buccutite快速抗体标记试剂盒的主要特点:

1标记25?g至1mg抗体;

2标签的选择包括HRP、AP、藻红蛋白（PE）、别藻蓝蛋白（APC）、PerCP、PE串联染料和APC串联染料;

3标记时间少于2小时，无需纯化;

4100%抗体回收率;

人PBMC细胞的流式细胞分析：用Buccutite快速PE抗体标记试剂盒（目录号1310）或Lightning LinkPE制备的抗人CD4抗体。使用FITC通道中的ACEA-NovoCyte流式细胞仪监测荧光信号。

表 4. Buccutite Rapid 抗体标记试剂盒

产品名称	Ex (nm)	Em (nm)	规格	货号
Buccutite Rapid Protein Crosslinking Kit Microscale Optimized for Crosslinking 100 ug Antibody Per Reaction	-	-	2 Labelings	1315
Buccutite Peroxidase (HRP) Antibody Conjugation Kit Optimized for Labeling 1 mg Protein	-	-	1 Kit	5504
Buccutite Peroxidase (HRP) Antibody Conjugation Kit Optimized for Labeling 100 ug Protein	-	-	1 Kit	5503
Buccutite Peroxidase (HRP) Antibody Conjugation Kit Optimized for Labeling 25 ug Protein	-	-	2 Labelings	5505
Buccutite Rapid PE Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	565	575	2 Labelings	1310
Buccutite Rapid PE Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	565	575	2 Labelings	1312
Buccutite Rapid PE-Texas Red Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	565	600	2 Labelings	1318
Buccutite Rapid PE-Texas Red Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	565	600	2 Labelings	1343
Buccutite Rapid PE-Cy5 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	565	674	2 Labelings	1322
Buccutite Rapid PE-Cy5 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	565	674	2 Labelings	1340
Buccutite Rapid PE-Cy5.5 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	565	700	2 Labelings	1316
Buccutite Rapid PE-Cy5.5 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	565	700	2 Labelings	1341
Buccutite Rapid PE-Cy7 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	565	780	2 Labelings	1317
Buccutite Rapid PE-Cy7 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	565	780	2 Labelings	1342
Buccutite Rapid PerCP Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	482	677	2 Labelings	1325
Buccutite Rapid PerCP Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	482	677	2 Labelings	1353
Buccutite Rapid APC Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	651	665	2 Labelings	1311
Buccutite Rapid APC Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	651	665	2 Labelings	1313
Buccutite Rapid APC-Cy5.5 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	651	700	2 Labelings	1320
Buccutite Rapid APC-Cy5.5 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	651	700	2 Labelings	1350
Buccutite Rapid APC-iFluor 700 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	651	713	2 Labelings	1319
Buccutite Rapid APC-iFluor 700 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	651	713	2 Labelings	1347
Buccutite Rapid APC-Cy7 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 100 ug Antibody Per Reaction	651	780	2 Labelings	1321
Buccutite Rapid APC-Cy7 Tandem Antibody Labeling Kit Microscale Optimized for Labeling 25 ug Antibody Per Reaction	651	780	2 Labelings	1351