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Epigentek:原位 DNA 损伤检测试剂盒

发布者:艾美捷科技    发布时间:2025-07-21     
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DNA损伤是细胞基因组不稳定的核心诱因,与癌症发生、衰老及遗传性疾病密切相关。当细胞暴露于辐射、化疗药物或环境毒素时,DNA双链断裂(DSB)是最致命的损伤类型,可导致染色体畸变和细胞凋亡。研究DNA损伤的修复机制对理解肿瘤耐药性、开发靶向疗法至关重要。例如,肺癌患者中DNA损伤修复(DDR)基因突变显著影响预后和靶向治疗响应[39],而放疗的疗效直接依赖于细胞对DSB的修复能力。

γH2AX(磷酸化组蛋白H2AX)是DSB的最早期、最特异的分子标志物。DSB激活ATM/ATR激酶,触发H2AX丝氨酸139位点(Ser139)磷酸化,形成γH2AX焦点(foci),每个焦点对应一个DSB位点。γH2AX焦点数量与DSB严重程度正相关,可量化评估放疗/化疗的基因毒性。在三维肺上皮模型中,γH2AX持续存在提示修复失败,导致染色体断裂和癌变风险。

γH2AX.png 

Epigentek提供的原位 DNA 损伤检测试剂盒(货号P-6001),可用于通过原位检测 H2AXSer139 磷酸化来判断 DNA 损伤或细胞凋亡。该试剂盒为即用型,能够特异性地在培养的贴壁细胞中通过检测磷酸化 H2AXSer139 来原位测定 DNA 损伤。检测原理:在该实验中,贴壁细胞首先被接种于常规 96 孔板中培养;接受实验处理后,细胞经固定与透膜处理。随后,利用抗磷酸化 H2AXSer139 抗体检测 DNA 损伤的敏感标志物——H2AX 第 139 位丝氨酸的磷酸化水平。通过 HRP 标记的二抗显色系统即可定量磷酸化 H2AXSer139 的比例或总量,显色强度与 DNA 损伤程度成正比。


原位 DNA 损伤检测试剂盒(货号P-6001)核心优势:

1. 原位保留空间信息:无需细胞裂解,直接检测孔板内细胞,避免修复蛋白定位丢失。

2. 高通量 & 快速:3小时内完成检测,适配96孔板自动化平台。

3. 无需复杂设备:仅需酶标仪,无需流式细胞仪或显微成像。

 

DNA 损伤检测试剂盒(货号P-6001)应用场景:

研究领域

典型应用

癌症治疗

评估放疗/化疗药物(如紫杉醇、氮芥)的基因毒性

药物开发

筛选DDR抑制剂(如HDAC抑制剂)的协同疗效

毒理学

检测纳米材料(如金刚石纳米颗粒)、树脂单体的DNA损伤风险

代谢应激研究

量化能量应激(如葡萄糖剥夺)诱导的DSB

文献案例:黑色素瘤放疗-化疗协同机制研究

文献标题:Synergetic effect of high dose rate radiations and paclitaxel selectively eliminates melanoma cells (Int. J. Mol. Sci., 2022)


研究设计:

模型:黑色素瘤细胞系暴露于高剂量率X射线(10 MV, 2400 MU/min) + 紫杉醇。

试剂盒:原位 DNA 损伤检测试剂盒(货号P-6001)

流程:

1.细胞辐照后1小时固定,原位检测γH2AX。

2.比色法(450 nm)定量DSB水平。

结论:高剂量辐射联合紫杉醇显著提升γH2AX表达(较单一处理高3.2倍),证实协同诱导DSB。


Epigentek的EpiQuik In Situ DNA Damage Assay Kit(货号P-6001)以γH2AX为分子灯塔,为DNA损伤研究提供快速、精准、可量化的解决方案。无论是探索癌症治疗新策略,还是评估环境毒性,它都是解锁基因组稳定性研究的钥匙!

 


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