Arbor Assays：Myelophil

文献标题：Anti-central fatigue effects of myelophil in 5-HTergic hyperactivity mice model

DOI：https://doi.org/10.1186/s12906-025-04882-2

研究背景

疲劳是一种常见的症状，可分为急性、长期和慢性疲劳。慢性疲劳对生活质量有显著影响，尤其是在癌症患者和患有肌痛性脑脊髓炎/慢性疲劳综合征（ME/CFS）的人群中。中枢疲劳与神经肌肉功能障碍相关，主要由大脑的生化变化引起。其主要机制被认为是大脑中5-HT和多巴胺（DA）的失衡。5-HT在大脑的多种生理和心理功能中起关键作用，其水平异常升高可能导致中枢疲劳。Myelophil是一种基于韩国传统医学经验开发的补充剂，用于治疗疲劳相关疾病。先前的研究已证实其在抗肌肉疲劳、抗神经炎症和抗氧化等方面的作用，但其对中枢疲劳的具体机制尚不清楚。

研究目的

本研究旨在通过氟西汀（一种选择性5-HT再摄取抑制剂，SSRI）诱导的5-HT过度活跃小鼠模型，探讨Myelophil的抗中枢疲劳效应及其潜在机制。

研究方法

1. Myelophil的制备和标准化：通过30%乙醇提取黄芪根和丹参根，按照韩国食品药品管理局（KFDA）的良好生产规范（GMP）指南生产Myelophil，并通过超高效液相色谱（UHPLC）和液相色谱-质谱联用（LC/MS）进行分子指纹分析。

2. 动物实验设计：使用9周大的雄性C57BL/6J小鼠，随机分为5组，每组8只。分别为生理盐水组、氟西汀组、Myelophil 100 mg/kg组、Myelophil 50 mg/kg组和阳性对照组（维生素C 100 mg/kg）。氟西汀通过腹腔注射给药4周，同时各组分别给予相应的口服处理。

3. 行为测试：通过巢筑测试、轮跑测试、旋转杆测试、足底测试和旷场测试评估小鼠的疲劳相关行为、运动能力、焦虑和疼痛敏感性。

4. 血清皮质酮水平测定：通过ELISA试剂盒测定血清中皮质酮水平。

5. 免疫荧光染色和西方印迹分析：用于检测大脑中5-HT水平及相关蛋白（如5-HT转运体、单胺氧化酶A等）的表达。

实验结果

1．Myelophil对疲劳相关行为的影响：氟西汀处理的小鼠表现出疲劳相关行为，如巢筑评分降低、轮跑测试中运动距离和潜伏时间减少。Myelophil（100 mg/kg）显著改善了这些疲劳相关行为，但50 mg/kg剂量的Myelophil和阳性对照组（维生素C）未观察到显著效果。

2．Myelophil对焦虑和疼痛敏感性的影响：氟西汀处理增加了小鼠的疼痛敏感性和焦虑行为，而Myelophil（100 mg/kg）显著减轻了疼痛敏感性，但对焦虑行为无显著影响。

3．Myelophil对血清皮质酮水平的影响：氟西汀处理降低了血清皮质酮水平，而Myelophil处理有恢复的趋势，但未达到统计学显著性。

4．Myelophil对5-HT过度活跃的影响：免疫荧光染色显示，氟西汀处理使小鼠脑中5-HT水平升高约1.4倍，而Myelophil（100 mg/kg）显著降低了这种升高。此外，Myelophil还显著调节了5-HT合成/释放相关蛋白（如TPH2、5-HT1AR、VMAT2和MAO-A）的表达，并增加了5-HT再摄取相关蛋白（5-HTT）的表达。

5．Myelophil对BDNF活性的影响：氟西汀处理抑制了BDNF蛋白表达，而Myelophil（100 mg/kg）显著逆转了这种抑制，并通过调节相关分子（如TrkB、p-CREB和c-Fos）发挥作用。

在文献《Anti-central fatigue effects of myelophil in 5-HTergic hyperactivity mice model》中，Corticosterone Multi-Format ELISA Kit 的主要应用是用于测定小鼠血清中皮质酮（Corticosterone）的水平。具体应用如下：

评估氟西汀（Fluoxetine）处理对小鼠血清皮质酮水平的影响，以及Myelophil干预是否能够调节这种变化。皮质酮是一种重要的应激激素，其水平的变化可以反映机体的应激状态。

使用 Corticosterone Multi-Format ELISA Kit（货号K014-H，Arbor Assays），通过酶联免疫吸附测定（ELISA）技术定量检测小鼠血清中的皮质酮水平。该试剂盒采用竞争性ELISA方法，通过特异性抗体与皮质酮结合，利用酶促反应产生的颜色变化来定量检测皮质酮。经过4周的氟西汀处理，小鼠血清中皮质酮水平显著降低，约为正常水平的0.6倍。Myelophil（100 mg/kg）处理有恢复血清皮质酮水平的趋势，但未达到统计学显著性。该结果表明，氟西汀诱导的中枢疲劳模型中，小鼠的应激反应受到抑制，表现为血清皮质酮水平下降。

Myelophil虽然未能显著恢复皮质酮水平，但其对其他疲劳相关行为和神经生物学指标的改善作用提示其可能通过其他机制发挥抗疲劳效应。

试剂盒特点

高灵敏度：能够检测低至20.9 pg/mL的皮质酮。

多格式：适用于不同样本量的检测，提供50 ?L和100 ?L两种检测格式。

适用范围广：可用于检测血清、血浆、尿液、呼吸蒸汽、组织培养基等多种样本类型。