Cell Biolabs：StemTAG 碱性磷酸酶试剂盒

干细胞（Stem Cell）研究

无论您是研究造血、间充质、胚胎还是神经干细胞，Cell Biolabs提供各种工具来支持这些细胞的培养和表征。

1.碱性磷酸酶检测

碱性磷酸酶（AP）是一种广泛应用于小鼠和人胚胎干细胞（ES）和胚胎生殖细胞（EG）的标志物。Cell Biolabs的StemTAG 碱性磷酸酶试剂盒提供了一个有效的系统，使用AP标记来监测细胞分化或未分化。

StemTAG 碱性磷酸酶检测试剂盒提供试剂，通过免疫细胞化学染色或96孔板定量，比色或荧光读数监测碱性磷酸酶活性。

Alkaline Phosphatase Activity Assays, 96-Well

碱性磷酸酶AP活性检测试剂盒

货号：CBA-301

规格：100 assays

检测方法：比色法

△测量胚胎干细胞和胚胎生殖细胞中普遍存在的碱性磷酸酶标记物

△通过比色或荧光板阅读器定量活性

Alkaline Phosphatase Activity Assays, ICC Staining

碱性磷酸酶AP活性检测试剂盒，ICC染色

货号：CBA-300、CBA-306

规格：100 assays

检测方法：ICC染色法

△测量胚胎干细胞和胚胎生殖细胞中普遍存在的碱性磷酸酶标记物

△ICC染色检测

使用StemTAG?碱性磷酸酶染色试剂盒对未分化和分化的胚胎干细胞进行染色。小鼠胚胎干细胞（ES-D3）在LIF存在的明胶包被培养皿中保持未分化状态。为了诱导分化，在几天内停用LIF；观察到不同的分化事件（细胞变平、变大，增殖减少）。在第5天结束时，根据StemTAG 碱性磷酸酶染色试剂盒检测方案对细胞进行染色。

2.造血CFC检测

△甲基纤维素培养基支持造血细胞菌落的生长

△完全定量造血干细胞，无需人工细胞计数

△试验周期7-10天，而不是3周

造血干细胞（HSC）是一种具有良好特征的组织特异性干细胞，负责造血系统的终身维持。造血干细胞或造血祖细胞被称为集落形成细胞（CFC），当在合适的3D环境中培养时，如补充营养和细胞因子的甲基纤维素，会增殖形成离散的集落。

Cell Biolabs的CytoSelect 96孔造血集落形成细胞试验可在7-10天内促进HSC集落的形成。然后可以在荧光板读取器中对细胞进行定量，或者从CFC检测培养基中回收细胞进行进一步的下游分析。

CytoSelect 96孔造血集落形成细胞测定原理

使用CytoSelect 96孔造血集落形成细胞试验形成集落。

3. 饲养细胞Feeder Cells

干细胞在培养基中的生长需要一定的营养物质来支持细胞处于未分化状态。诸如白血病抑制因子（LIF）之类的添加物对小鼠胚胎干细胞的培养起作用，但对人类胚胎干细胞可能没有同样的效果。在这种情况下，通常使用馈线单元层。

我们提供两种类型的饲养细胞：

△MEF饲养细胞是小鼠胚胎纤维母细胞，多年来一直用于促进干细胞培养。我们的MEF细胞不是原代细胞，通常可以传代大约6周而不会衰老。

△SNL 76/7饲养细胞克隆来源于小鼠成纤维细胞STO细胞系，该细胞系已转化为新霉素抗性和小鼠LIF基因。这种永生化细胞系已被证明可作为胚胎干细胞生长的饲养细胞，也可用于培养人和小鼠的iPS细胞。

MEF Feeder Cells

△小鼠胚胎成纤维细胞允许无LIF的干细胞培养

△以5 × 10^6个细胞在1ml中呈现

△在添加ES细胞之前必须进行有丝分裂灭活

SNL 76/7 Passage-Independent Feeder Cells

△永生化细胞系来源于小鼠成纤维细胞STO细胞，转化小鼠LIF和新霉素耐药基因

△用于培养人或小鼠iPS细胞以及胚胎干细胞生长

△在添加干细胞之前必须进行有丝分裂灭活

碱性磷酸酶试剂盒常见问题：

问题1：Cell Biolabs的碱性磷酸酶试剂盒是否依赖于物种或细胞类型？

答：Cell Biolabs所有的碱性磷酸酶试剂盒可用于任何表达碱性磷酸酶的细胞类型，如成骨细胞。试剂盒不依赖于细胞类型或物种。

问题2：我用Cell Biolabs的StemTAG?碱性磷酸酶试剂盒来鉴定我的分化细胞和未分化细胞。我惊讶地发现，与未分化的细胞相比，我的分化细胞实际上显示出更高水平的碱性磷酸酶。为什么会发生这种情况？

答：与干细胞相比，绝大多数成年细胞的碱性磷酸酶活性要低得多。然而，也有少数细胞，如成骨细胞，在分化后实际上表达更高水平的碱性磷酸酶。

问题3：两种碱性磷酸酶染色试剂盒有什么区别？

答：Cell Biolabs的两款碱性磷酸酶染色试剂盒通过免疫细胞化学染色检测未分化细胞的AP活性，使用红色（#CBA-300）或紫色（#CBA-306）染料。红色染料通常比紫色染料的效果更清晰。

问题4：碱性磷酸酶染色试剂盒可以用于组织切片染色吗？

答：是的，Cell Biolabs的染色试剂盒适用于任何具有AP活性的组织或细胞类型，只要它们没有石蜡包埋，就可以与组织切片兼容，因为石蜡包埋会杀死活性。

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