泛素研究

泛素是一种小分子多肽，可通过其C-末端与靶蛋白赖氨酸残基上的氨基结合。这种共轭被称为单泛素化。其他的泛素部分可以利用7个赖氨酸残基中的任何一个（K6，K11，K27，K29，K33，K48和K63）与该初始泛素缀合。这些泛素链的形成被称为多泛素化。这些聚合物中最广泛表征的是通过K48或K63连接。

什么是Anti-K63 TUBE, FLAG？

串联结合实体Tandem Ubiquitin Binding Entities（TUBEs）的开发和使用正在成为泛素研究不可或缺的策略，是多聚泛素分离和表征的革命。FLAG标记的Anti-K63 TUBE是从细胞和组织提取物或体外合成混合物中有效分离和富集K63-多聚泛素的理想试剂。其由多个泛素蛋白相互作用基序（UIM）组成，与其它链接类型相比，K63-TUBE对K63链的多聚泛素的亲和力会强上1000至10,000倍，这将是一种极度灵敏且经济的工具。对于K63-TUBE进行不同的修饰，可以满足不同研究者的多样化实验需求。该肽在体外的表达抑制K63连接的多聚泛蛋白依赖性过程并保护K63连接的多聚泛蛋白链免于降解。分离的泛素化蛋白质可以通过蛋白质印迹，质谱或进一步的生化分析来检测。

什么是去泛素化酶和泛素样异肽酶抑制剂?

泛素途径酶（如DUB）小分子抑制剂的细胞可渗透性对于研究这些酶的细胞功能具有高度的实用性。其中PR-619是一种非选择性，可逆的泛素和泛素样异肽酶抑制剂，而且细胞的处理导致了泛素和相结合的蛋白质的积累。PR-619可用于多种应用，包括细胞系和组织切片的体内处理，也可以加入裂解缓冲液以产生细胞提取物用于进一步分析。在进行细胞和组织裂解物纯化时，使用PR-619可以保护内源性DUB（非特异性结合亲和树脂）的多聚泛素化蛋白质标签。

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