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酶联免疫斑点检测(ELISpot)

发布者:艾美捷科技    发布时间:2021-04-27     
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疫苗即是通过诱导体液免疫和细胞免疫达到预防相应传染病的目的。因此,中和抗体和细胞免疫也是病毒疫苗有效性评价中非常重要的指标。那么哪种方法可以评估疫苗引起的体液免疫和细胞免疫呢?ELISPOT可以给你答案:


酶联免疫斑点检测(Enzyme-linked Immunospot Assay,ELISPOT)是将细胞培养技术和ELISA技术相结合,可以原位地检测培养细胞体外分泌蛋白的高灵敏分析技术。根据技术原理,主要分为T细胞与B细胞ELISpot两种。其中T细胞ELISpot主要用于检测刺激后细胞所分泌的痕量细胞因子,而B细胞ELISpot主要用于检测抗体分泌B细胞的频率。


详情查看:1、T细胞和B细胞ELISPOT:评价疫苗有效性的金标准


IFN-γ ELISpot检测方法

IFN-γ作为免疫活性细胞分泌的细胞因子在诱导抗病毒免疫中起着重要的免疫调理作用,包括激活细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocyte,CTL)、自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)细胞和吞噬细胞等,而在疫苗免疫后机体产生IFN-γ的水平实际上反映辅助性T细胞的活动。因此,检测IFN-γ的水平就是间接地检测辅助性T细胞活性。目前,检测IFN-γ的水平已经逐渐代替各种传统的细胞免疫检测手段,目前也已成为疫苗引起的细胞免疫效应评估的“金标准”。


详情查看:1、IFN-γ ELISpot法:有效评估疫苗引起的细胞免疫效应


Elisplot阳性对照的设置问题:

为了使实验结果更具说服力,大部分实验都需要设置对照组,通过对照组与实验组的比对分析,以排除无关变量的影响,Elisplot检测也一样,通常一次严谨的ELISpot实验通常需要设置以下三种对照

阳性对照——细胞经特异性抗原或多克隆抗体刺激  用来确定试剂盒正常工作,细胞功能完整;排除假阴性结果

阴性对照——细胞不经刺激  用来确定自发分泌因子的细胞个数;排除假阳性结果

背景对照——不加细胞和其他所有试剂  用来排除试剂或其他介质的影响产生的斑点;排除假阳性结果


详情查看:1、Mabtech肽库帮您一键解决ELISpot阳性对照的设置问题


产品推荐:


 1、B细胞ELISpot检测指标包括人,非人灵长类,小鼠,牛、猪等种属的IgG,IgA,IgM以及IgE,下表仅列出人的做为参考,其他种属的B细胞ELISpot检测指标,详询艾美捷科技。

类型货号名称
IgA3860-2HHuman IgA ELISpotBASIC kit (HRP)
IgE3810-2HHuman IgE ELISpotBASIC kit (HRP)
IgG3850-2HHuman IgG ELISpotBASIC kit (HRP)
IgG13851-2HHuman IgG1 ELISpotBASIC (HRP)
IgG23852-2HHuman IgG2 ELISpotBASIC kit (HRP)
IgG2a3822-2HMouse IgG2a ELISpotBASIC kit (HRP)
IgG2b3823-2HMouse IgG2b ELISpotBASIC kit (HRP)
IgG2c3824-2HMouse IgG2c ELISpotBASIC kit (HRP)
IgG33853-2HHuman IgG3 ELISpotBASIC kit (HRP)
IgG43854-2HHuman IgG4 ELISpotBASIC kit (HRP)
IgM3880-2HHuman IgM ELISpotBASIC kit (HRP)

 

2、提供各种不同种属的IFN-γ ELISpot试剂盒

货号名称说明
3420-2AHuman IFN-gamma ELISpotBASIC kit (ALP)包被抗体;生物素标记检测抗体;链霉亲和素-ALP
3420-2APT-2Human IFN-gamma ELISpotPRO kit (ALP)阳性对照品;预包被透明板;ALP标记检测抗体;底物(BCIP/NBT)
3420-2APW-2Human IFN-gamma ELISpotPRO kit (ALP)阳性对照品;预包被白色板;ALP标记检测抗体;底物(BCIP/NBT)
3420-2AST-2Human IFN-gamma ELISpotPRO kit (ALP), strips阳性对照品;可拆卸预包被透明板;ALP标记检测抗体;底物(BCIP/NBT)
3420-2HHuman IFN-gamma ELISpotBASIC kit (HRP)包被抗体;生物素标记检测抗体;链霉亲和素-HRP
3420-2HPT-2Human IFN-gamma ELISpotPRO kit (HRP)阳性对照品;预包被透明板;HRP标记检测抗体;底物(TMB)
3420-2HPW-2Human IFN-gamma ELISpotPRO kit (HRP)阳性对照品;预包被白色板;HRP标记检测抗体;底物(TMB)
3420-2HST-2Human IFN-gamma ELISpotPRO kit (HRP), strips阳性对照品;可拆卸预包被透明板;HRP标记检测抗体;底物(TMB)
3420-4APT-2Human IFN-gamma ELISpotPLUS kit (ALP)阳性对照品;预包被透明板;生物素标记检测抗体;链霉亲和素-ALP;底物(BCIP/NBT)
3420-4APW-2Human IFN-gamma ELISpotPLUS kit (ALP)阳性对照品;预包被白色板;生物素标记检测抗体;链霉亲和素-ALP;底物(BCIP/NBT)
3420-4AST-2Human IFN-gamma ELISpotPLUS kit (ALP), strips阳性对照品;可拆卸预包被透明板;生物素标记检测抗体;链霉亲和素-ALP;底物(BCIP/NBT)
3420-4HPT-2Human IFN-gamma ELISpotPLUS kit (HRP)阳性对照品;预包被透明板;生物素标记检测抗体;链霉亲和素-HRP;底物(TMB)
3420-4HPW-2Human IFN-gamma ELISpotPLUS kit (HRP)阳性对照品;预包被白色板;生物素标记检测抗体;链霉亲和素-HRP;底物(TMB)
3420-4HST-2Human IFN-gamma ELISpotPLUS kit (HRP), strips阳性对照品;可拆卸预包被透明板;生物素标记检测抗体;链霉亲和素-HRP;底物(TMB)


3、提供开发的肽库可以作为T细胞的抗原特异性阳性对照,且所有肽库都经过验证,都可用于ELISpot、FluoroSpot和FC。


货号名称规格
3616-1CEF peptide pool for human CD8 T cells23x25?g
3618-1CEF extended peptide pool for human CD8 T cells32x25?g
3617-1CEFTA peptide pool for human CD4 T cells35x25?g
3619-1CMV peptide pool for human CD4 and CD8 T cells42x25?g

 

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