PD-1(程序性死亡受体1)由日本学者本庶佑(Honjo)团队于1992年发现,属于免疫球蛋白超家族成员,其表达与细胞凋亡调控密切相关。研究显示,PD-1通过与配体PD-L1/PD-L2结合形成免疫抑制信号通路,调控T细胞活化阈值以防止自身免疫反应。PD-1基因缺陷小鼠出现抗体分泌亢进及自发性自身免疫病(如肾炎、关节炎),证实该分子对免疫稳态的调控作用。
肿瘤细胞通过高表达PD-L1与T细胞PD-1结合,抑制T细胞功能并形成免疫抑制微环境,这是肿瘤免疫逃逸的核心机制。针对该通路的PD-1/PD-L1抑制剂可阻断免疫负调控,恢复T细胞抗肿瘤活性,目前已成为黑色素瘤、非小细胞肺癌等实体瘤的一线免疫治疗手段。
货号 | 名称 | 应用 |
InVivoPro Anti-Mouse PD-1(CD279) in vivo antibody, Clone RMP1-14 抗小鼠 PD-1(CD279) 体内抗体,克隆号RMP1-14 | 体内阻断PD-1/PD-L1信号 |
一、推荐的腹腔注射方案
1. 推荐剂量范围(下方内容仅供参考,需根据实验情况进行优化)
研究类型 | 剂量方案(基于独立研究汇总) |
常规剂量 | 200–250 ug/次/鼠 |
肾癌模型 | 每4天注射250 ug,共4次 |
肝癌模型 | 术前24h注射250 ug,术后第3/7天重复 |
三阴性乳腺癌 | 200 ug/次,联合治疗 |
黑色素瘤 | 200 ug/次,每周1次 |
按体重折算 | 5–10 mg/kg |
食管癌模型 | 10 mg/kg,每3天1次 |
肺癌模型 | 5–7 mg/kg,每周3次 |
*实验抗体最佳给药剂量与频率需依据实验条件调整,包括宿主品系、疾病模型、干预周期、靶组织特性及抗原表达水平等参数差异。建议优先查阅目标抗体的产品说明书,参考同类实验系统的已发表数据作为基准参数;在此基础上开展系统性剂量梯度与给药频次优化实验,建立符合特定研究需求的精准给药方案。
2. 注射体积(Volume)
类型 | 推荐值 |
常用体积 | 100–200 μL |
溶剂选择 | 无菌PBS (pH 7.2),无内毒素 |
举例 | 200 ug抗体原液,用PBS,稀释到200 uL |
3. 注射频率
肿瘤类型 | 频率 | 依据 |
快速进展型肿瘤 | 每3–4天一次 | 肾癌/结肠癌模型 |
慢性肿瘤 | 每周1–2次 | 黑色素瘤/胰腺癌 |
术前辅助治疗 | 单次术前24 h | 肝癌模型 |
二、关键操作规范与优化建议
1. 溶剂与稳定性控制
·缓冲液要求:优先使用无菌的pH 7.2 PBS缓冲液,避免抗体聚集
·禁用溶剂:禁止使用含内毒素溶剂(所有研究默认无菌处理)
·浓度配置:推荐1–2 ug/uL(如200 ug/100–200 uL)以平衡渗透压与分布效率
2. 体积安全阈值
·单次极限:≤10 mL/kg(100 uL/20 g小鼠)
·保守建议:≤5 mL/kg(100 uL/20 g小鼠),避免腹腔压力骤升
3. 联合治疗策略
类型 | 联合方案 |
免疫检查点联用 | 抗CTLA-4(100 ug,IV0109) + 抗PD-1(100 ug,IV0100) |
非抗体联用 | 氧微囊(瘤内) + 抗PD-1(200 ug) p53蛋白(瘤内) + 抗PD-1(200 ug) |
三、毒性监测与对照设置
1. 免疫相关不良反应(irAE),常见症状:
? 体重下降>20%
? 肠道菌群紊乱
2. 必需对照组
对照组类型 | 方案 | 目的 |
同型对照 | Rat IgG2a(货号IV0105) | 排除非特异性激活 |
溶剂对照 | 无菌PBS缓冲液 | 排除溶剂影响 |
单药对照 | 仅用联合药物中的一种 | 评估协同效应 |
四、特殊模型注意事项
1. 小鼠体重差异调整
? 幼鼠(<15 g) :按10 mg/kg折算剂量(如10 g小鼠注射100 μg)
? 肥胖模型:按 瘦体重(Lean Body Mass) 计算,避免过高剂量
2. 肿瘤类型特异性调整
? 肝癌伴肝硬化:剂量降至150 μg/次,避免肝功能恶化
? 胰腺癌(低免疫浸润):增加局部治疗(如氧微囊)以增强抗体渗透
五、方案总结表
参数 | 参考推荐 | 调整范围 |
单次剂量 | 200 ug/鼠 | 200–250 ug 或 5–10 mg/kg |
抗体浓度 | 1–2 ug/μL | 依研究效果进行调整 |
注射体积 | 100–200 μL | ≤200 uL(20 g小鼠) |
注射频率 | 每3–7天一次 | 依肿瘤进展速度调整 |
安全监测 | 体重+行为学+心脏标志物 | 联合治疗时每周2次 |
* 操作Tip:
取200 ug RMP1-14抗体,溶于200 uL PBS缓冲液,22–25 g小鼠,45°角左下腹进针,注射速度≤50 uL/s(避免脏器损伤),首次给药后48 h监测体重,下降>15%时剂量调整为150 ug/次。
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