Flag标签抗体在免疫沉淀IP&免疫荧光IF中的应用

发布者:艾美捷科技发布时间:2010-03-13

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Flag标签系统是已被公认的用于表达、纯化以及检测融合蛋白的表达系统,广泛应用于Western blotting、免疫细胞组化、免疫共沉淀、流式细胞术、蛋白纯化以及蛋白相互作用、蛋白分离等多个研究领域。Flag标签是一个与重组蛋白相融合的由8个亲水氨基酸(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)组成的多肽片断。FLAG标签只有8个氨基酸组成,因此它不会占据其他表位与结合域,避免导致融合蛋白的功能、分泌性以及转运发生改变。由于它的亲水性特点,FLAG标签倾向于定位在融合蛋白表面,因此更易与抗体结合以及被肠激酶酶解。

 

由于Flag标签可位于蛋白质的C端或N端,这一系统已用于各种细胞类型,包括细菌、酵母和哺乳细胞。由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。Abbkine的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(货号#A02010)可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测Flag融合表达蛋白等。比如在免疫荧光IF的实验里,同时配合Abbkine的Dylight 549荧光二抗,使用该抗体可以准确的定位出Flag融合表达蛋白在细胞内的位置(如图红色显示部分)。另外,做融合表达分析前,通过免疫共沉淀技术获得Flag融合表达蛋白也是非常重要的一步,因此选择一个合适的、可用于免疫共沉淀(Immunoprecipitation,IP)Flag标签抗体也是很必要的。Abbkine的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(货号#A02010)不仅能应用于细胞内定位的IF实验,同样还能应用于IP实验。1:200甚至更高的IP实验稀释比率,也说明了该抗体本身的具有很高的效价,同时,因为是单克隆抗体,因此特异性也很高。高效价所对应的高稀释比率也意味着超高性价比。

Flag标签抗体 EarthOx Flag抗体用于IP及WB实验
Flag标签抗体(#A02010)用于IF免疫荧光实验 Flag标签抗体(#A02010)用于WB实验(Line 4为1:10000稀释)

 

Flag抗体推荐—可进行WB/IF/IP检测的Flag标签抗体
产品名称及描述 品牌 货号 产品说明
Anti-Flag Tag Mouse Monoclonal Antibody (1B10) Abbkine A02010 详情
Anti-Flag Tag Rabbit Polyclonal Antibody Abbkine A02011 详情
HRP Conjugated Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody (1B10) Abbkine A02015 详情

 

除了上面所说的IP和IF实验,Flag标签抗体的基本应用还包括WB实验,Abbkine的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(货号#A02010)在该应用中同样表现优异。说明书的推荐起始稀释比例是1:1000,但在如上图所示的实验中,在1:10000的稀释比率下也表现优异(Abbkine也进行了50000次以后的稀释,仍然显示出很好的条带显示,没有在说明书里列出)。因此Abbkine的Flag标签抗体不但能通过WB实验很好的满足融合蛋白表达量的分析,并且在免疫荧光IF、免疫沉淀IP的试验中也有很好的表现,能满足Flag标签融合蛋白的细胞内定位以及纯化的需要,而且其高效价和特异性,远远比其他Flag抗体具有更高的性价比。更多该抗体的信息,请点击查看:Abbkine Flag标签抗体

 

更多Flag标签抗体以及其他如His、HA、Myc、GST、GFP(如EGFP、EYFP)等其他标签抗体,请电话垂询。美国Abbkine致力于为生命科学研究和医疗发展提供最新的产品和技术,艾美捷将其引入中国,作为其中国区域代理,将为客户提供最具性价比的常规免疫学试剂,如各种标签抗体、内参抗体、常规一抗以及全系列二抗,抗体检测底物以及相关试剂盒等。同时我们作为多家国际知名品牌的的中国代理或区域代理,能为您提供系列的实验室解决方案。如果您对上述产品感兴趣,请致电全国免费电话400-6800-868 转801/802/803  或者027-84454412/4876 到艾美捷科技有限公司垂询相关的产品信息及完整实验解决方案。

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