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GeneCopoeia转染试剂,攻坚克难:快、准、狠

发布者:艾美捷科技    发布时间:2019-11-26     
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细胞转染是指将外源基因如DNA,RNA等导入细胞内的一种技术。根据哺乳动物细胞蛋白表达流程,细胞培养完成后需进行细胞转染,根据不同的实验目的可选择不同的转染方法。目前,常用的细胞转染方法主要分为三类途径:物理介导(电穿孔法,基因枪法、显微注射法)、化学介导(脂质体转染法、磷酸钙共沉淀法、阳离子聚合物介导法)、生物介导(病毒介导转染、原生质体转染)。

 


 

脂质体转染原理图

 

细胞转染方法

细胞转染原理

主要特点

适用类型

阳离子脂质体转染法

带正电荷的脂质体靠静电作用和DNA 结合形成 DNA-脂质体复合物,然后通过细胞的内吞作用进入细胞

·操作简便
·适用于各种裸露的DNA和RNA片段
·适合转染各种细胞
·对DNA浓度有一定要求
·重复性好,但转染时需除血清

瞬时转染
稳定转染
所有细胞

DEAE-右旋糖苷法

带正电的DEAE-右旋糖苷与核酸的磷酸基团形成带正电的复合物,复合物和带负电的细胞膜接触后而被细胞膜摄取

·有一定的毒性
·操作简单,适用性广
·重复性好,但转染时需除血清

瞬时转染

磷酸钙法

磷酸钙能够促进外源DNA和细胞的结合,磷酸钙-DNA复合物能够附着到细胞表面,并通过内吞作用进入细胞

·操作简单
·对DNA浓度要求高
·适用性有局限(不适用于原代细胞)

瞬时转染
稳定转染

电穿孔法

高脉冲的电压破坏细胞膜,在细胞膜表面形成孔道,DNA通过孔道进入细胞

·适用性广,适用于质粒和几十kb的基因组片段
·针对不同细胞要优化实验条件细胞
·致死率较高

瞬时转染
稳定转染
所有细胞

显微注射法

利用显微操作系统和显微注射技术将
DNA直接注入到细胞中

·整合率较高,适用于工程改造和转基因动物的建立
·操作复杂,且需要昂贵精密的设备
·外源基因的整合位点和拷贝数无法控制,会导致片段缺失、突变

瞬时转染
稳定转染

逆转录病毒转染

通过病毒的膜蛋白和细胞表面的受体相互作用而进入细胞,利用宿主细胞酶自行转录复制合成DNA,并随机整合到细胞基因组中

·转染效率高,适用于难转染细胞转染利用病毒介导转染,外源基因整合较稳定
·逆转录病毒只选择感染分裂细胞
&middot;容纳外源基因长度<8kb

瞬时转染
稳定转染
特定细胞

 

随着分子生物学的发展,转染已经成为研究和控制细胞基因功能、实现基因调控的常规工具。理想的基因转染试剂应该具有如下特点:高效转染;安全;低细胞毒性;方法简单;省时、经济。

 

作为NCBI推荐的基因克隆供应商,GeneCopoeia推出5款不同类型的转染试剂:

 

※ EndoFectin&trade; Max(基于脂质体转染原理的转染试剂)

 

产品特性

  1. 对比Lipofectamine&reg; 2000,EndoFectin&trade; Max在多种哺乳动物细胞中具有更优良的转染效率,适用于多种细胞系的转染操作;

  2. 对比Lipofectamine&reg; 3000,EndoFectin&trade; Max具有同等或更高的转染效率;

  3. 对比Lipofectamine&reg; 2000,EndoFectin&trade; Max对siRNA和质粒均有更优良的转染效率;

  4. 细胞毒性低;

  5. 进行转染操作时,不需提前去除细胞培养液或血清;

  6. 进行转染操作后,不需清洗细胞或更换培养基;

  7. 适用于基因过表达、基因敲减、敲除的常规转染操作,亦适用于微孔板的高通量转染操作。

货号

名称

适用性

EF003

EndoFectin&trade; Max转染试剂 (1 mL)

广泛适用于多种细胞

EF004

EndoFectin&trade; Max转染试剂 (3 mL)

 

※ CRISPR-Fectin&trade;(CRISPR-Cas9核蛋白专用的转染试剂)

 

产品特性

  1. 专门用于Cas9蛋白和合成的sgRNA的转染实验;

  2. 与其它公司的同类型产品相比,具有更高的转染效率;

  3. 转染前无需提前去除细胞培养液或血清;

  4. 转染后无需更换培养基。

货号

名称

适用性

EF015

CRISPR-Fectin&trade; 转染试剂 (1 mL)

优化的CRISPR-Cas9核蛋白专用的转染试剂。可与GeneHero&trade; Cas9蛋白配合使用

EF016

CRISPR-Fectin&trade; 转染试剂 (3 mL)

 

※ EndoFectin&trade; Expi293(为Expi293F悬浮细胞进行优化设计)

 

产品特性

  1. 特别为Expi293F悬浮细胞进行优化设计,配合Expi293F悬浮细胞使用,可提高实验效率;

  2. 与其它公司的同类型产品相比,在Expi293F悬浮细胞的转染效率更高;

  3. 进行转染操作时,不需提前去除细胞培养液或血清;

  4. 进行转染操作后,不需清洗细胞或更换培养基;

  5. 适用于基因过表达、基因敲减、敲除的常规转染操作,亦适用于微孔板的高通量转染操作

货号

名称

适用性

EF007

EndoFectin&trade; Expi293 转染试剂 (1 mL)

专注转染悬浮细胞293F,转染效率极高

EF009

EndoFectin&trade; Expi293 增强转染试剂盒 (1L 转染用量)

EF010

EndoFectin&trade; Expi293 增强转染试剂盒 (10L 转染用量)

 

※ EndoFectin&trade; HepG2特别为常用细胞系HepG2进行优化设计

 

产品特性

  1. 特别为常用细胞系HepG2进行优化设计,HepG2是一种通常情况下较难转染的细胞;

  2. 与Lipofectamine&reg; 2000、Lipofectamine&reg; 3000相比,对HepG2细胞有更高的转染效率;

  3. 在HepG2细胞的转染效果可与电转染方法媲美,方便您以更简便快捷的方式获得高转染效率;

  4. 对比Lipofectamine&reg; 2000,对siRNA和质粒都有更高的转染效率;

  5. 进行转染操作时,不需提前去除细胞培养液或血清;

  6. 进行转染操作后,不需清洗细胞或更换培养基。

 

货号

名称

适用性

EF005

EndoFectin&trade; HepG2 转染试剂 (1 mL)

为常用细胞系HepG2进行优化设计

EF006

EndoFectin&trade; HepG2 转染试剂 (3 mL)

 

※ EndoFectin&trade; Lenti(一种基于阳离子转染原理的、高效的转染试剂)

 

产品特性

  1. 转染293T细胞,可收获更高滴度的慢病毒

  2. 对比市场其它同类型产品,EndoFectin&trade; Lenti可为慢病毒包装操作带来更高的转染效率和更高的产物滴度(如下图)

 

EndoFectin&trade; Lenti

 

货号

名称

适用性

EF001

EndoFectin&trade; Lenti转染试剂 (1 ml)

转染293T细胞,可收获更高滴度的慢病毒

EF002

EndoFectin&trade; Lenti转染试剂 (3 ml))

GeneCopoeia致力于为国内生命科学工作者提供一流的产品和及时周到的服务,通过丰富的基因、蛋白、抗体、分析试剂盒等产品线,加速您的研究进程。作为GeneCopoeia在中国的区域一级代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供最全面的GeneCopoeia产品以及客户订制化服务。

 

作为GeneCopoeia在中国的区域总代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供最全面的GeneCopoeia公司产品以及客户订制化服务。

 

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